Dernière mise à jour: Août 17, 2026
Cellule souche embryonnaire，ESC，ES pour faire court、Les cellules EK ou ESC) sont un type de cellules isolées des premiers embryons (avant le stade gastrula) ou des gonades primordiales.，Il a une prolifération illimitée en culture in vitro、Propriétés d’auto-renouvellement et de multi-différenciation。Environnements in vitro et in vivo，Les cellules ES peuvent être amenées à se différencier en presque tous les types de cellules du corps。
La recherche sur les cellules souches embryonnaires est un domaine controversé aux États-Unis，Les partisans croient que cette recherche peut aider à guérir de nombreuses maladies difficiles et compliquées.，Parce que les cellules souches embryonnaires peuvent se différencier en cellules pluripotentes APSC aux fonctions multiples，Considéré comme un acte de charité qui sauve des vies，C'est une manifestation du progrès scientifique。Les opposants pensent，La recherche sur les cellules souches embryonnaires nécessite la destruction des embryons，L’embryon est la forme de vie présente dans l’utérus avant la formation d’une personne.，C'est anti-bioéthique。
Le nom chinois de cellule souche embryonnaire et le nom étranger de cellule souche embryonnaire désignent les cellules isolées d'embryons précoces ou de gonades primitives, abrégées en cellules ES ou EK. Le premier exemple était celui du hamster en 1981.、rat、lapin、cochon、bœuf、mouton
Table des matières
1 Introduction
2 fonctionnalité
▪ Caractéristiques morphologiques
▪ Caractéristiques de différenciation
▪ Caractéristiques des ingrédients
3 Raison « toute-puissante »
4 Progrès de la recherche
▪ Cellules ES de souris
▪ Cellules ES de rat
▪ Cellules ES porcines
▪ Cellules ES bovines
▪ Cellules ES de mouton
▪ Cellules ES de lapin
▪ Cellules ES de vison
▪ Cellules ES de hamster
▪ Cellules ES de primates et humaines
5 Candidatures et perspectives
▪ Produire des animaux clonés
▪ Animaux transgéniques
▪ Transplantation d'organes et de tissus
▪ Pour la thérapie cellulaire
6 recherche et controverse
▪ Bush s'est fermement opposé
▪ Argumenter avec raison
▪ Obtenez une assistance juridique
▪ De nouvelles orientations de recherche
Diffusion de l'éditeur d'introduction
cellules souches embryonnaires
cellules souches embryonnaires
Depuis qu'Evans et Kaufman ont réussi à isoler pour la première fois des cellules ES de souris en 1981，Des chercheurs nationaux et étrangers ont étudié les hamsters、rat、lapin、cochon、bœuf、mouton、chèvre、Vison、singe rhésus、Des cellules ES ont été isolées chez des singes vervets américains et chez des humains，Et il a été démontré que les cellules ES de souris peuvent se différencier en cardiomyocytes.、cellules hématopoïétiques、cellules du sac vitellin、cellules de la moelle osseuse、cellules musculaires lisses、cellules graisseuses、chondrocytes、ostéoblastes、cellules endothéliales、mélanocytes、cellules nerveuses、cellules gliales、oligodendrocytes、Lymphocytes、cellules d'îlots、Cellules trophoblastiques, etc.。Les cellules ES humaines peuvent également se différencier en cellules trophoblastiques、cellules nerveuses、cellules gliales、cellules hématopoïétiques、Cardiomyocytes, etc.。Les cellules ES peuvent non seulement être utilisées comme modèle pour étudier la différenciation cellulaire et les mécanismes de régulation du développement in vitro，Il peut également être utilisé comme support，Introduction de mutations dirigées vers un site dans le génome produites par recombinaison homologue chez des individus，Quoi de plus important，Les cellules ES apporteront une révolution à la médecine de transplantation humaine。
plus loin，Les cellules souches embryonnaires (cellules ES) sont des cellules hautement indifférenciées。il a une totipotence développementale，Peut se différencier dans tous les tissus et organes des animaux adultes，y compris les cellules germinales。L'étude et l'utilisation des cellules ES sont l'une des questions centrales dans le domaine actuel de la bio-ingénierie.。La recherche sur les cellules ES remonte aux années 1950，Depuis la découverte des cellules souches de tératome (cellules EC), le processus de recherche biologique sur les cellules ES a commencé. [1] 。
À l’heure actuelle, de nombreux travaux de recherche sont menés avec les cellules ES de souris comme objet de recherche.，Avec la recherche croissante sur les cellules ES,，La compréhension des cellules ES humaines par les scientifiques de la vie est entrée dans une nouvelle étape。fin 1998，Deux groupes de recherche ont cultivé avec succès des cellules ES humaines，Maintient la totipotence des cellules ES pour se différencier en diverses cellules somatiques。Cela permet aux scientifiques d’utiliser des cellules ES humaines pour traiter diverses maladies。Cependant，La recherche sur les cellules ES humaines a suscité une grande controverse dans le monde，pour des raisons socioéthiques，Certains pays ont même interdit la recherche sur les cellules ES humaines。Tant du point de vue de la recherche fondamentale que de l’application clinique，Les avantages que les cellules ES humaines apportent aux humains dépassent de loin les éventuels impacts éthiques négatifs.，Par conséquent, les appels à la recherche sur les cellules ES humaines se font de plus en plus forts. [1] 。
Diffusion de l'éditeur de fonctionnalités
Caractéristiques morphologiques
Les cellules ES ont une structure morphologique similaire aux cellules embryonnaires précoces，Gros noyau，Avoir un ou plusieurs nucléoles，Le noyau est principalement constitué d'euchromatine，Moins de cytoplasme，Structure simple。Lorsqu'il est cultivé in vitro，Les cellules sont serrées，Cultiver en colonies。coloration à la phosphatase alcaline，Les cellules ES sont rouge brunâtre，Les fibroblastes environnants sont jaune clair。Il existe une frontière claire entre le clone cellulaire et son environnement，Les cellules clonées formées ne sont pas clairement délimitées les unes des autres，Il existe des gouttelettes lipidiques à forte réfraction à la surface des cellules.。Les clones cellulaires ont des morphologies diverses，La plupart sont en forme d'île ou de nid。Le diamètre des cellules ES de souris varie de 7 microns à 18 microns.，cochon、bœuf、Les cellules ES de mouton sont de couleur plus foncée，Diamètre 12 microns ~ 18 microns。
Caractéristiques de différenciation
1.Versatilité
La totipotence des cellules ES fait référence au potentiel de développement des cellules ES à participer à divers tissus, notamment les gonades, dans des conditions où l'inhibition de la différenciation est levée.，Autrement dit, les cellules ES ont la capacité de se développer en un corps animal complet.，Il peut fournir du matériel expérimental abondant pour la manipulation génétique des cellules et la recherche sur la différenciation cellulaire.。La totipotence développementale des cellules ES se caractérise par l’expression d’un antigène embryonnaire spécifique à un stade spécifique à la surface des cellules ES.，AESS），Et l'expression du gène Oct4 peut être vérifiée，Ces deux protéines sont des marqueurs de la totipotence développementale。Les activités AKP et télomérase sont plus élevées dans les cellules ES，Peut être utilisé pour identifier si les cellules ES sont différenciées ou non。
La totipotence est la principale différence entre les cellules souches embryonnaires et les cellules souches pluripotentes chez l'adulte.。dans des conditions normales de culture，Les cellules souches embryonnaires subissent de multiples divisions cellulaires，Toujours capable de conserver sa polyvalence [2] 。
2.pluripotence
La pluripotence des cellules ES fait référence à la capacité des cellules ES à se développer en une variété de tissus.，Participer à la formation de certaines organisations。Culture de cellules ES sur milieu sans inhibiteurs de différenciation，Des corps embryonnaires peuvent se former。Cultiver des cellules ES dans des milieux spécifiques，Peut être différencié en tissus spécifiques，Comme les cellules ES sur milieu de culture contenant le facteur inhibiteur de la leucémie (LIF) et l'acide rétinoïque (RA)，Peut se différencier en endoderme à paroi complète，Co-culturer des cellules ES avec des cellules embryonnaires ou injecter des cellules ES dans le blastocèle，Les cellules ES participent au développement de divers tissus [3] 。
Les cellules souches embryonnaires ont la pluripotence (Pluripotence)，Caractérisé par la différenciation cellulaire(Différenciation cellulaire)dans plusieurs organisations (toutes les organisations，y compris les cellules germinales)，Mais il ne peut pas se développer seul en un individu (en utilisant la technologie de fusion tétraploïde, on peut obtenir un individu complètement développé à partir des cellules ES utilisées)。il peut se transformer en ectoderme、Les tissus cellulaires des trois feuillets germinaux, le mésoderme et l'endoderme。La pluripotence évoquée ici est différente des cellules aux multiples potentiels de différenciation que l’on comprend habituellement.，Très facile à distinguer parmi les mots anglais，L'un est la pluripotence；L'un est la multipotence。Les cellules souches adultes peuvent-elles conserver une différenciation pluripotente ?，C'est encore controversé jusqu'à présent (le passage in vitro n'est généralement pas utilisé pour développer des cellules souches adultes)。mais，Des études ont démontré que des cellules souches pluripotentes peuvent être générées à partir de nombreuses cellules, notamment les fibroblastes.，Il s'agit des cellules souches pluripotentes induites actuellement à la mode (cellules souches pluripotentes induites).，Cellules iPS），À l'heure actuelle, de plus en plus de données montrent qu'il existe encore de grandes différences entre ce type de cellules souches pluripotentes et les cellules souches embryonnaires.。
Caractéristiques des ingrédients
Les cellules souches embryonnaires sont très différentes des cellules ordinaires，A ses caractéristiques de croissance spécifiques et ses signes spécifiques，Par exemple, l’activité de la phosphatase alcaline est très élevée，Avec des antigènes de surface spécifiques au stade embryonnaire( Scène- antigènes embryonnaires spécifiques,AESS)，Les cellules souches embryonnaires humaines portent également la glycoprotéine TRA1-60 de haut poids moléculaire.、TRA-1-81 et autres marques，Ces caractéristiques et marqueurs peuvent être utilisés pour identifier les cellules souches embryonnaires，en plus，Les cellules souches embryonnaires peuvent également être transférées de manière permanente in vitro，et maintenir un caryotype normal。Ajouter des inhibiteurs de différenciation tels que des facteurs inhibiteurs de la leucémie au système de culture in vitro( Facteur inhibiteur de la leucémie,LF)ou dans les couches nourricières de fibroblastes embryonnaires de souris(MEF)En cultivant，Les cellules souches embryonnaires peuvent proliférer par clonage，Garder le caryotype normal et stable pendant longtemps，La congélation et la décongélation n'affecteront pas les caractéristiques de non-différenciation.。en outre，Les cellules souches embryonnaires présentent également des niveaux élevés d’activité télomérase，Il est actuellement prouvé que la télomérase est étroitement liée au vieillissement cellulaire，La plupart des cellules matures ont une très faible activité télomérase。Ce sont les caractéristiques importantes qui différencient les cellules souches embryonnaires des cellules matures.，C’est peut-être aussi la raison pour laquelle leur durée de vie réplicative est beaucoup plus longue que celle des cellules somatiques. [2] 。
Diffusion de l'éditeur de raison "Tout-Puissant"
Les cellules souches des embryons naturels sont des cellules « totipotentes »，Peut se différencier en tous types de cellules。Des scientifiques suisses ont découvert，Le secret des propriétés totipotentes des cellules embryonnaires réside dans une protéine。Cette protéine s'appelle Pramel7，Il est présent dans les premières cellules embryonnaires，Peut empêcher le code ADN (acide désoxyribonucléique) du génome d'être marqué avec des étiquettes chimiques « scellées »，Garder le génome ouvert [4] 。
Toutes les cellules transportent l’ensemble complet des informations génétiques d’un organisme，Mais des cellules différenciées，comme le sang、Les os et les cellules nerveuses n’appellent que la partie du code ADN liée à leurs propres fonctions.，Le reste du code sera composé de groupes méthyle，L'expression des gènes est inhibée。Plus le degré de méthylation est faible，Plus le génome est ouvert，Plus le potentiel de différenciation cellulaire est grand [4] 。
Lorsque l’œuf fécondé est au stade blastocyste，À l’intérieur se trouve un amas de cellules appelé « masse cellulaire interne ».，Ils ont de vraies propriétés polyvalentes。extraire ces cellules，Laissez-les se multiplier indéfiniment dans une boîte de laboratoire sans différencier，Les cellules souches embryonnaires obtenues présentent également un fort potentiel de différenciation，Mais il est toujours inférieur au groupe cellulaire interne [4] 。
Rapport des chercheurs dans la revue Nature Cell Biology，Le gène qui contrôle la synthèse de la protéine Pramel7 est actif dans la population cellulaire interne，Cependant, il est moins actif dans les cellules souches embryonnaires cultivées artificiellement.。Améliorer l'expression de ce gène dans les cellules souches embryonnaires artificielles，Peut réduire les niveaux de méthylation dans le génome [4] 。
La protéine Pramel7 ne fonctionne que pendant les premiers jours du développement embryonnaire，Mais il est essentiel de maintenir un développement normal。Résultats expérimentaux，Si les gènes concernés sont désactivés，Les niveaux de méthylation génomique augmentent considérablement，Les cellules souches arrêtent de se développer，provoquer la mort embryonnaire [4] 。
Cette découverte pourrait contribuer à améliorer le potentiel de différenciation des cellules souches embryonnaires artificielles，Pour la recherche médicale et la réparation d'organes。L’équipe espère s’appuyer sur ces données et développer un moyen d’utiliser les cellules souches pour traiter de graves lésions osseuses.。 [4]
Diffusion de l'éditeur de progrès de recherche
cellules ES de souris
transfert nucléaire de cellules somatiques
transfert nucléaire de cellules somatiques
La méthode d'isolement des cellules ES de souris est fondamentalement mature，et a été largement utilisé dans divers domaines de la recherche en sciences de la vie。1981Evans a isolé pour la première fois des cellules ES de souris，Il a retiré chirurgicalement les ovaires de souris 2,5 jours après la fécondation et les a combinés avec des injections d'hormones pour interférer avec l'environnement utérin.，retardant ainsi l'implantation de l'embryon，Recycler les embryons，Cultivez-le in vitro sur la couche nourricière de cellules STO，En conséquence, une lignée cellulaire ES de souris a été obtenue.。Martin G R a utilisé l'immunochirurgie pour éliminer les cellules trophoblastiques du blastocyste de souris，masse cellulaire interne(ICM)et placez-le sur la couche d'alimentation de cellules STO，Le milieu est un milieu conditionné par des cellules PSA-1 ES de souris.，En conséquence, des cellules ES de souris ont également été obtenues。par la suite，Axelord et coll. utilisé la méthode des microgouttelettes pour obtenir la lignée cellulaire ES de souris；Kaufman et coll. établi une lignée cellulaire ES autodiploïde en utilisant des blastocystes de souris haploïdes à implantation retardée；Wobus et coll. établi une lignée cellulaire ES de souris pour la première fois en utilisant des fibroblastes primaires de souris comme couche nourricière.；Smith et coll. ont d'abord établi une lignée cellulaire ES de souris en utilisant un milieu conditionné par des hépatocytes de rat comme inhibiteur de différenciation.。Brook F A et d'autres ont encore amélioré la méthode d'isolement des cellules ES de souris.，provenant de nombreuses souches de souris, y compris des souches consanguines et mutantes，Les cellules ES peuvent être obtenues。L’isolement des cellules ES de souris n’est pas seulement possible à partir des blastocystes，Il n'est pas nécessaire de compter sur des cellules nourricières。Dhaise et al. digéré 52 embryons de souris à 8 cellules en blastomères uniques et les a cultivés sur des couches nourricières primaires de fibroblastes de souris.，Le milieu de culture utilisé était le DMEM/F12，et ajoutez 100 mL/L de sérum de veau fœtal、100 mL/L de sérum de veau nouveau-né et 0,1 mmol/L de 2-mercaptoéthanol，5reine du ciel，Plusieurs colonies de cellules souches apparaissent，Une lignée cellulaire ES MSB1 a été établie après digestion et passage.。Injecter MSB1 dans SCID(souris immunodéficientes combinées sévères)souris，Peut produire des tératomes contenant une différenciation de trois couches germinales，L'injection de 52 blastocystes a produit 2 individus viables(1mâle，1femelle)，Cependant, les individus mâles sont stériles。Tojo et coll. utilisé la même méthode pour obtenir des souris hybrides(C57BL/6×DBA/2)8-Les embryons cellulaires ont également reçu des cellules ES。Les cellules ES de souris ont la capacité de proliférer indéfiniment et de s’auto-renouveler。Suda Y et coll. a transmis les cellules ES de souris pendant plus de 250 générations sans aucun signe de transformation.，Ils ont toujours un caryotype diploïde normal；Des gamètes normaux peuvent être produits dans des chimères germinales；Embryons clonés par recombinaison comme donneurs nucléaires。Les résultats ci-dessus indiquent que les cellules ES de souris sont immortelles [5] 。
cellules ES de rat
Iannaccone PM et al. isolé et cloné la lignée cellulaire ES de rat-RESC à partir de la souche consanguine PVG de rat.-01，Cette lignée cellulaire est positive pour SSEA-1 et AKP，Prolifère bien sur la couche nourricière des fibroblastes fœtaux de rat，Peut se différencier en une variété de types de cellules dans l'environnement in vivo。Résauter-01Les corps embryonnaires formés lorsque les lignées cellulaires étaient cultivées en suspension in vitro présentaient des mouvements de contraction rythmés.，Des chimères peuvent être générées en les injectant dans des blastocystes et en les transplantant chez des souris femelles pseudo-enceintes.。Kawase et coll. également utilisé des fibroblastes fœtaux de rat comme couche nourricière.，La lignée cellulaire RES-DA1ES a été isolée de la souche de rat DA et établie，Sa morphologie est similaire à celle des cellules ES de souris，Exprime les antigènes AKP et 4C9。Brenin et al ont également utilisé différentes méthodes pour isoler les cellules ES.。Sun et coll. utilisé des cellules ES de rat comme donneurs nucléaires.，Progéniture obtenue par transplantation nucléaire。Vassilieva et coll. découvert que les cellules ES de rat expriment SSEA-1、Marqueurs cellulaires tels que Oct-4 et IL-6 [5] 。
cellules ES porcines
Recherche sur les cellules souches embryonnaires
Recherche sur les cellules souches embryonnaires(16ouvrir)
Piedrahita J A et d'autres adoptent STO、Fibroblastes porcins et cellules épithéliales utérines porcines comme couches nourricières，Milieu de culture à base de DMEM，Isolement des cellules ES du blastocyste porcin ICM，Il a été constaté que l'ICM du blastocyste porcin peut s'attacher et proliférer sur la couche nourricière STO ou PMEF.，Cependant, bien qu’ils puissent adhérer à la couche nourricière des fibroblastes fœtaux porcins, ils prolifèrent très peu.，La mort surviendra si elle n'est pas transmise pendant 4 générations。Evans et coll. Des blastocystes porcins âgés de 6 à 7 jours ont été cultivés directement sur des mangeoires STO.，Les cellules ICM ont été sélectionnées, multipliées et sous-cultivées pour établir une lignée cellulaire ES porcine.。Strojek RM et al. Je pense que l’embryon optimal pour isoler les cellules ES porcines est le blastocyste du 10ème jour.。La recherche montre，6Les embryons âgés d'un jour à sept jours sont susceptibles de mourir pendant la culture.，Le taux d'acquisition de clones ICM est extrêmement faible，Les embryons au jour 10 sont faciles à cultiver，Le taux d'acquisition de clones ICM est élevé，Mais les cellules sont faciles à différencier。Vasil'ev I M et al ont étudié les étapes du développement embryonnaire、Type moyen、Cellules nourricières et autres facteurs affectant l’isolement des cellules ES porcines，Les résultats montrent que les blastocystes préimplantatoires à différents stades de développement constituent le facteur limitant affectant l’isolement des cellules ES porcines.。Wheeler MB et al. rapporté que les cellules ES porcines peuvent former des chimères normales et des corps embryonnaires kystiques contenant la différenciation de trois couches germinales.，Sous l'action de l'acide rétinoïque et du DMSO，Les cellules ES porcines peuvent se différencier en cellules épithéliales、cellules musculaires、cellules graisseuses、Fibroblastes, etc.，Miyoshi et coll. Cellules ES porcines isolées à partir de blastocystes fécondés in vitro，et utilisation de cellules de type ES comme donneurs nucléaires，Des blastocystes de transfert nucléaire ont été obtenus。Il existe relativement peu d’études nationales sur l’isolement et le clonage de cellules ES porcines.，Li Song et coll. isolé des cellules ES porcines et les a transmises à la deuxième génération.，Sur cette base，Xu Jun et coll. transmis des cellules ES de porc à la troisième génération，Feng Xiuliang et d'autres ont transmis des cellules ES de porc à la cinquième génération，Feng Shutang et al ont également isolé des cellules ES porcines，Dans le même temps, les cellules isolées ont été initialement détectées et identifiées.，Pluripotence démontrée [5] 。
cellules ES bovines
Saito et coll. ICM bovin cultivé en milieu contenant du LIF.，Isoler les cellules ES bovines et les transmettre。Sims et coll. a utilisé une méthode de culture à faible densité qui est complètement différente de l'isolement général des cellules ES.，Utiliser des BRL(foie de rat buffle)Milieu conditionné et sélénite de sodium ajouté、insuline、Transferrine et 50 mL/L de sérum de veau fœtal，Culture pendant 6 jours ~ 10 jours，15 lignées cellulaires ES ont été obtenues，Ils ont été utilisés comme donneurs nucléaires pour une transplantation nucléaire afin d'obtenir 659 embryons reconstruits.，Taux de clivage 70%，Taux de blastocystes 24 %，34 embryons ont été transplantés chez 27 mères pseudo-enceintes.，13tête de grossesse，A finalement donné naissance à 4 veaux。Et Stice SL et al ont rapporté，Bien que les embryons recombinants créés à partir de cellules ES bovines comme donneurs nucléaires deviendront enceintes après transplantation chez le receveur，Mais la durée de gestation ne dépasse pas 60 jours，Principalement dû à une malformation du placenta，Y compris absence de cotylédons et réaction hémorragique des tempes utérines。Si l'embryon recombinant est chimérique avec un embryon normal à 8 cellules，L'embryon chimérique peut se développer jusqu'à 85 jours，Le fœtus manque également de cotylédons，L'analyse de l'ADN a confirmé que 50 % du tissu fœtal chimérique provenait de cellules ES。Ito et coll. analysé et comparé l'effet de l'isolement ICM des cellules ES à partir de blastomères et de blastocystes de morula cultivés in vivo et in vitro.，En conséquence, des cellules de type ES n’ont été obtenues que dans le groupe des blastocystes.。Cibelli et coll. isolé 27 lignées cellulaires ES provenant de 49 ICM d'embryons bovins âgés de 7 jours.，Introduction du gène de la β-galactosidase dans les cellules ES par injection，Sélectionnez les cellules ES transfectées et injectez-les dans des embryons bovins de 8 à 16 cellules，18 embryons ont été transférés à 7 receveurs，Après 5 semaines de grossesse，j'ai 12 fœtus。Testez le fœtus，6fœtus dans les gonades ou dans les cellules germinales primordiales(PGC)Gènes marqueurs détectés dans，Indique que les cellules ES sont impliquées dans le chimérisme germinal。Cibelli et coll. a établi une méthode de production de cellules ES bovines transgéniques utilisant le transfert nucléaire de fibroblastes fœtaux bovins.，Obtention de 6 chimères。Mitalipova et coll. Cellules ES bovines isolées à partir de morula compactée，La souche cellulaire ES la plus élevée a atteint 150 générations，et exprimer SSEA-1、SSEA-3、Récepteur SSEA-4 et c-kit [5] 。
Le domestique Qian Yongsheng et d'autres utilisent PMEF comme couche d'alimentation，être transmis au 2 Génération de cellules ES bovines，Yang Qi et coll.、An Lilong et d'autres ont été transmis au troisième 3 Daihedi 6 Génération de cellules ES bovines，et a démontré sa pluripotence [5] 。
Cellules ES de mouton
Handyside et coll. utilisé des fibroblastes de peau de mouton et des fibroblastes fœtaux comme couches nourricières，Isolement de cellules de type ES provenant de blastocystes de mouton âgés de 7 à 8 jours，Le résultat était des cellules ressemblant à l’endoderme mais pas de cellules ES.。Tsuchiya utilise l'immunochirurgie pour isoler l'ICM de blastocystes de mouton âgés de 8 à 9 jours，Cultivé sur une couche nourricière de cellules STO，Obtention de 2 lignées cellulaires de type ES，Transmis à la 4ème génération。Tillmann et coll. utilisé des fibroblastes de foie de bovin fœtal comme couche nourricière pour isoler les cellules ES de mouton de la 20e génération et les cellules ES de chèvre de la 40e génération.。Modinski et coll. cellules ES de mouton chimérisées avec des blastocystes pour obtenir deux moutons chimériques.。Campbell et coll. utilisé des cellules ES du 1er au 3ème passage comme donneurs nucléaires pour la transplantation nucléaire.，J'ai 4 moutons [5] 。
Cellules ES de lapin
Graves KH et al. Cellules ES isolées de blastocystes préimplantatoires de lapin，et procédé à une identification préliminaire，Démontrer leur capacité à proliférer à l’état indifférencié sur une couche nourricière，Repiquage in vitro pendant plus d'un an，J'ai toujours un caryotype normal，Et peut former un corps embryonnaire contenant des produits différenciés des trois feuillets germinaux。après，Niemann et coll. utilisé PMEF comme couche d'alimentation，Création de 9 lignées cellulaires ES de lapin。Schoonjans L et coll. injecté des cellules ES de lapin dans des blastocystes pour obtenir des lapins chimériques comprenant la lignée germinale。Chen Ying et coll. utilisé PMEF comme couche nourricière pour cultiver des blastocystes divisés de lapin，En conséquence, des cellules ES de lapin transmises à 7 générations ont été obtenues.，Chimérisation de cellules ES de lapin de deuxième passage avec des blastocystes，Obtenez 1 bébé lapin chimère en fourrure，Cependant, il n’a pas été confirmé si les cellules ES sont impliquées dans le chimérisme germinal. [5] 。
Cellules ES de vison
Sukoyan et coll.、Établissement de 8 lignées cellulaires ES de vison à l'aide de blastocystes et d'ICM，4 d'entre eux sont de type XX，4Chacun est de type XY。Les deux tiers des cellules ES dérivées de la morula et de l'ICM ont des chromosomes X activés，Et 70 à 100 % des cellules ES dérivées de blastocystes possèdent un chromosome X inactif.。Dans les cellules ES dérivées de morula et ICM，L'activité G6PD (glucose-6-phosphate déshydrogénase) des cellules du génotype XX est deux fois supérieure à celle des cellules du génotype XY.，Cellules ES dérivées de blastocystes，L'activité G6PD des cellules de génotype XX est équivalente à celle des cellules de génotype XY.。Injection de cellules ES à des souris immunodéficientes，Les cellules dérivées de la morula et de l'ICM peuvent former des corps embryonnaires kystiques et des tératomes contenant la différenciation de trois feuillets germinaux，Ceux-ci indiquent que la pluripotence des cellules ES dérivées de la morula et de l'ICM est supérieure à celle des cellules ES dérivées de blastocystes. [5] 。
Cellules ES de hamster
Doetschman et coll. établissement de quatre lignées cellulaires ES à partir de blastocystes de hamster doré syrien (Mesocricetus auratus)，Tous ont des caryotypes normaux et 44 chromosomes，1L'un est de type XX，3Chacun est de type XY，Ils sont capables de proliférer sur la couche nourricière PMEF (fibroblastes embryonnaires primaires de souris) et de rester indifférenciés.，Pendant la culture en suspension，Peut former des corps embryonnaires contenant du tissu ectodermique embryonnaire et du tissu musculaire cardiaque，Cependant, il n’a pas été confirmé si les cellules ES de hamster peuvent participer à la formation de chimères germinales.。Les hamsters sont le deuxième mammifère après les souris à établir des lignées de cellules ES。
Cellules ES primates et humaines
Thomson et coll. isolé et établi une lignée cellulaire ES (R278.5) à partir de blastocystes de singe rhésus.，Et prouvé que cette lignée cellulaire peut maintenir un état indifférencié et un caryotype XY normal après une culture continue pendant un an.，Expression du marqueur d'antigène de surface cellulaire AKP、SSEA-3 (antigène embryonnaire 3 spécifique au stade)、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81, etc.，Semblable aux cellules hEC。Chez les souris dépourvues de couche de fibroblastes，Même si le facteur FRV existe toujours，Les cellules R278.5 peuvent également se différencier en divers types de cellules。Cette différenciation sécrète de la CG (gonadotrophine chorionique)，Et exprimer les sous-unités α-CG et β-CG et l'ARNm de l'α-foetoprotéine，Lorsqu'il est injecté à des souris SCID，Peut se différencier pour former des dérivés de trois couches germinales。C’est la première fois que des cellules ES de primates sont isolées avec succès。après，Thomson et coll. établi 8 lignées cellulaires ES à partir du blastocyste de Callithrix jacchus ICM.，Ils expriment une gamme de marqueurs cellulaires des cellules hEC et rhésus ES，如AKP (phosphatase alcaline)、SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81，8Chaque lignée cellulaire possède 46 chromosomes，7 d'entre eux sont de type XX，1L'un est de type XY，2Deux lignées cellulaires (Cj11 et Cj62) peuvent maintenir un état indifférencié et maintenir une structure chromosomique normale après une sous-culture continue pendant plus d'un an.。Après retrait de la couche nourricière des fibroblastes fœtaux (même si le LIF est toujours présent)，Ces lignées cellulaires peuvent se différencier en une variété de types cellulaires，Les cellules différenciées sécrètent de la CG (gonadotrophine chorionique) et expriment l'α-CG、β-CG、ARNm de l'α-fœtoprotéine，Prouver que ces cellules appartiennent aux cellules trophoblastiques et aux cellules de l'endoderme。Lorsqu'il est cultivé à haute densité，Cette lignée cellulaire peut former des corps embryoïdes，Semblable aux premiers embryons après l’implantation。chez les humains，Bongso et coll. utilisé des cellules épithéliales des trompes de Fallope humaines comme couche nourricière，Le milieu de culture est celui d’Earle，Plus 10 % de sérum humain，21 embryons humains à 2 cellules ont été cultivés in vitro jusqu'au stade blastocyste，Le résultat était 19 ICM complets，Deux des ICM différenciés en fibroblastes，Les 17 ICM restants présentaient des caractéristiques typiques des colonies de cellules souches au cours des 2 passages suivants.，AKP positif，Caryotype normal。C’est la première fois que des cellules ICM humaines sont isolées et cultivées avec succès in vitro depuis au moins 2 générations.。Par la suite, le groupe de Thomson a rapporté que cinq lignées cellulaires ES avaient été isolées de la masse cellulaire interne de 14 blastocystes humains fécondés in vitro.，Après 5 à 6 mois de culture，exprime toujours fortement l'activité de la télomérase，A un caryotype normal (2 XX，3XY)，Exprime le marqueur antigénique de surface cellulaire SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81、AKP, etc.，Quatre des lignées cellulaires ES injectées à des souris SCID (immunodéficience combinée sévère) peuvent générer des tératomes.，L'histologie tumorale a confirmé que les tératomes contiennent des dérivés de trois feuillets germinaux。La différenciation in vitro peut former des cellules trophoblastiques et de l'épithélium intestinal、cartilage、os、muscle lisse、muscle strié、Produits neuroépithéliaux et autres trois produits de différenciation de la couche germinale。aussi，Reubinoff et coll. a également isolé deux lignées cellulaires ES pluripotentes humaines à partir de blastocystes ICM qui peuvent être cultivées, proliférées et transmises in vitro.，Et ont les caractéristiques des cellules ES des primates，Expression du facteur de transcription Oct-4，Lorsqu'il est transplanté chez des souris SCID，2Chaque lignée cellulaire hES peut former des tératomes contenant des tissus provenant de 3 couches germinales.。dans des conditions de culture in vitro，Deux lignées cellulaires hES peuvent se différencier en cellules extraembryonnaires, à savoir les cellules trophoblastiques qui sécrètent l'α-fœtoprotéine et la gonadotrophine chorionique, et diverses cellules somatiques.，Dans le même temps, les cellules progénitrices neurales peuvent également être isolées des produits de différenciation des cellules hES.，et induisent une maturation plus poussée des neurones [5] 。
domestique，Jusqu'à présent, je n'ai vu que Xu Ling et d'autres、Lu Guangxiu et coll. cellules ES humaines isolées à partir de morulas fécondées in vitro [5] 。
Diffusion de l'éditeur de candidatures et de prospects
Produire des animaux clonés
Les cellules ES peuvent théoriquement être traversées et proliférées indéfiniment sans perdre leur génotype et phénotype diploïdes normaux.，Après l'avoir utilisé comme donneur nucléaire pour une transplantation nucléaire，Un grand nombre d’individus présentant des génotypes et phénotypes identiques peuvent être obtenus en peu de temps.，Clonage chimérique d'animaux à l'aide de cellules ES et d'embryons，Peut résoudre le problème difficile de l’hybridation à distance chez les mammifères，Produire de nouvelles espèces d’animaux précieuses。Cette technologie peut également être utilisée pour le clonage d’animaux xénogéniques，Il est très important de protéger les animaux sauvages rares [6] 。
animaux transgéniques
Produire des animaux transgéniques à partir de cellules ES，Peut briser les frontières entre les espèces，Briser les limites de la parenté，Accélérer le degré de variation génétique des populations animales，Des mutations et des sélections dirigées peuvent être réalisées。Manipulation génétique des cellules ES à l'aide de la technologie de recombinaison homologue，Produire des animaux génétiquement modifiés par transfert nucléaire，Il est possible de créer de nouvelles espèces；Utilisation de la technologie des cellules ES，Sélection précoce des embryons possible au niveau cellulaire，Cela peut améliorer la précision de la sélection des échantillons，Raccourcir le temps de reproduction [6] 。
greffe de tissu d'organe
En tant que type de cellule ES appelée « cellule graine »，Fournir une grande quantité de matériel pour la transplantation clinique de tissus et d’organes。Une fois que les cellules ES humaines ont été épuisées en gènes de rejet immunitaire，Rediriger l’induction des organes cibles pour éviter le rejet de greffe interindividuel。De cette façon, il pourrait être possible de résoudre le problème du rejet de greffe entre individus allogéniques qui tourmente les communautés immunologique et médicale.。
pour thérapie cellulaire
population de cellules souches embryonnaires humaines
population de cellules souches embryonnaires humaines
La thérapie cellulaire fait référence à la transplantation directe ou à l'infusion de cellules humaines génétiquement modifiées dans le corps du patient.，Atteindre l’objectif de guérir et de contrôler les maladies。Les cellules ES peuvent toujours proliférer de manière stable et être transmises in vitro après une manipulation génétique。Utiliser des cellules ES comme supports，Transformation ciblée in vitro，Faire le nombre intégré de gènes、site、Le degré d'expression, la stabilité du gène inséré et le travail de criblage sont tous réalisés au niveau cellulaire.，facile à obtenir la stabilité、Lignées cellulaires ES transgéniques satisfaisantes，Afin de surmonter les difficultés de contrôle de l'intégration et de l'expression des gènes introduits dans la thérapie génique actuelle，Et les cellules utilisées pour la manipulation génétique ne peuvent pas être transfectées et proliférées de manière stable in vitro, ouvrant ainsi de nouvelles voies.。
La perspective et l'utilisation les plus attrayantes des cellules souches sont la production de cellules et de tissus pour la « thérapie cellulaire » afin de fournir des matériaux non immunogènes pour la transplantation cellulaire.。Les cardiomyocytes ont maintenant été amenés à se différencier des cellules ES、cellules osseuses、chondrocytes、cellules hépatiques、cellules hématopoïétiques、cellules graisseuses、cellules d'insuline、cellules nerveuses、Cellules endothéliales, etc.。Ces cellules induites devraient être utilisées pour la transplantation d’organes、Fournir des matières premières pour la réparation des organes endommagés,Ses perspectives d’application clinique sont donc très larges. [7] 。
Rédacteur en chef de la recherche et des controverses
La recherche sur les cellules souches embryonnaires a toujours été un domaine controversé，Les partisans croient que cette recherche peut aider à guérir de nombreuses maladies difficiles et compliquées.，un acte de charité qui sauve des vies，C'est une manifestation du progrès scientifique。Les opposants pensent，La recherche sur les cellules souches embryonnaires nécessite la destruction des embryons，L’embryon est la forme de vie présente dans l’utérus avant la formation d’une personne.。donc，Soutenir la recherche sur les cellules souches embryonnaires équivaut à encourager les autres à « tuer la vie ».，est immoral，immoral。
Bush s'y oppose fermement
Le 17 juillet 2006, le Sénat américain a débattu d'un projet de loi visant à augmenter le financement gouvernemental de la recherche sur les cellules souches embryonnaires.。nouvelles exigences de facturation，Augmenter le financement fédéral pour la recherche sur les cellules souches，pour ceux qui seront abandonnés、Embryons cliniques congelés pour la recherche sur les cellules souches embryonnaires。Le débat qui s'est tenu ce jour-là a été assez intense.，Les deux parties ont discuté avec beaucoup d’émotion des avantages et des inconvénients de ce projet de loi.。mais，A en juger par la situation actuelle，Il n'est pas difficile pour le Sénat d'adopter ce projet de loi。
Mais ce qui trouble beaucoup de gens, c'est l'attitude du président Bush.。Bush a déjà déclaré，Si ce projet de loi est adopté par le Sénat，Il n'hésitera pas à utiliser le veto présidentiel pour bloquer la mise en œuvre du projet de loi.。17jour，La Maison Blanche a de nouveau publié une déclaration similaire，Il a déclaré : "Il (le président) exercera son droit de veto sur le projet de loi"。
Les scientifiques étudiaient les cellules souches embryonnaires，Ils doivent tous faire un gros travail sur les embryons.，Certains pensent que cela sacrifierait l’embryon.，Cela signifie sacrifier indirectement une petite vie future.，Cela a donc suscité de nombreuses objections et réprimandes éthiques.。Le communiqué de la Maison Blanche dit："Ce projet de loi obligerait les contribuables américains à soutenir financièrement la recherche sur les cellules souches embryonnaires humaines.，Et nous ne devrions pas utiliser l’argent public pour soutenir des actions qui détruisent des vies.。»
certainement，Bush a aussi de nombreux alliés，Ils pensent aussi，Un embryon est une vie future，Ne tuez pas la vie juste pour faire de la recherche scientifique。En outre，La recherche sur les cellules souches embryonnaires en est encore à ses débuts，Encore un long chemin à parcourir avant les essais cliniques，Sans oublier utilisé pour traiter les maladies。"Nous ne pouvons pas être cruels en expérimentant sur certains embryons simplement parce qu'ils ne peuvent pas donner naissance à la vie.。» a déclaré le sénateur républicain Jim Bernning。"Quelqu'un sait combien d'embryons devront être détruits avant que des progrès substantiels puissent être réalisés dans ce domaine de recherche ?"
Argumenter en fonction de la raison
supporter，En particulier, certains républicains modérés estiment，Les Américains doivent développer la recherche sur les cellules souches。ils ont souligné，sur une base volontaire，Utiliser des embryons rejetés pour développer la recherche sur les cellules souches est la bonne chose à faire pour les Américains。La recherche sur les cellules souches reconnue pour avoir découvert la maladie d'Alzheimer、Espoirs de nouveaux traitements pour les maladies neurologiques et cérébrales telles que la maladie de Parkinson。
L'ancienne Première dame des États-Unis, Nancy Reagan, est une personne enthousiaste qui a activement promu l'élaboration de ce projet de loi.。son mari、L'ancien président Ronald Reagan est décédé de la maladie d'Alzheimer en 2004.，Et s'il y avait une percée dans la recherche sur les cellules souches，Cette maladie devrait être guérie à l'avenir。"Elle continue de parler de ça.。a déclaré le sénateur démocrate Edward Kennedy。"c'est connu，C'est grâce à ses efforts，Ce projet de loi n'existe qu'aujourd'hui，Ce n'est qu'alors qu'il est possible d'obtenir un résultat idéal。»
Le président de la commission judiciaire du Sénat, Spectre, est lui-même atteint d'un cancer.，Le cancer est également une maladie qui peut être traitée grâce à la recherche sur les cellules souches.，donc，Il est également l'un des partisans de cette motion。Il a également comparé les opposants à ce projet de loi à la résistance qui bloque l'avancement de la science.，Appelez-les "stupides"，irrationnel，absolument ridicule。»
Le chef de la majorité au Sénat, Frist, partage également ce point de vue.。il a dit："Nous nous unirons，Permettre à la science de continuer à progresser dans les limites éthiques et morales。»
200619 juillet，Le président américain Bush a utilisé son veto présidentiel pour la première fois en cinq ans depuis son entrée en fonction.，Un projet de loi du Sénat visant à financer la recherche sur les cellules souches embryonnaires a été rejeté，Cette décision a suscité de nombreux débats et inquiétudes dans tous les horizons.。Contrairement à cela，724 du mois，Les ministres responsables de la recherche scientifique des 25 pays de l'UE se sont réunis à Bruxelles pour décider，Continuera à financer les chercheurs de l’UE pour mener des recherches limitées sur les cellules souches humaines。Les controverses éthiques sont devenues un goulot d’étranglement limitant la recherche sur les cellules souches，Science et éthique redeviennent des partis opposés。
Obtenez une assistance juridique
Une cour d'appel fédérale américaine a rendu un arrêt le 29 avril 2011.，Permettre au gouvernement fédéral américain de continuer à financer la recherche sur les cellules souches embryonnaires humaines。Il s’agit d’une victoire d’étape importante pour les partisans de la recherche sur les cellules souches embryonnaires humaines aux États-Unis. [8] 。
La Cour d'appel du circuit du district de Columbia a annoncé dans sa décision ce jour-là，Annuler l'interdiction temporaire imposée l'année dernière par un juge d'un tribunal de district des États-Unis sur la recherche sur les cellules souches embryonnaires humaines.。Le jugement a également statué que，Le financement fédéral de la recherche sur les cellules souches embryonnaires humaines ne semble pas violer la loi américaine [8] 。
le 23 août de l'année dernière，Le juge du tribunal de district de Washington, Royce Lamberth, émet une injonction temporaire dans le cadre d'un procès intenté par deux chercheurs américains sur les cellules souches.，Interdit le financement fédéral de la recherche sur les cellules souches embryonnaires humaines, notamment pour violation de la loi。Lambert pense，Un amendement adopté par le Congrès « interdit explicitement » l'utilisation de fonds fédéraux pour financer toute recherche nécessitant la destruction d'embryons humains.，Toute recherche sur les cellules souches embryonnaires humaines implique la destruction d'embryons，Par conséquent, les réglementations des National Institutes of Health sur la recherche sur les cellules souches embryonnaires humaines violent cet amendement. [8] 。
Cependant, la Cour d'appel du circuit du district de Columbia a déclaré dans sa dernière décision que，Il y a des "ambiguïtés" dans les amendements ci-dessus，Les National Institutes of Health ont des raisons de croire，L'amendement interdit la pratique destructrice consistant à extraire des cellules souches d'embryons，Mais rien n’interdit le financement fédéral de projets de recherche utilisant uniquement des cellules souches embryonnaires humaines.。La Cour d'appel a donc invalidé l'injonction provisoire émise par Lamberth l'année dernière. [8] 。
Un porte-parole de la Maison Blanche américaine a déclaré ce jour-là，La Cour d'appel déclare une « victoire » pour les scientifiques américains et les patients du monde entier，Les patients bénéficieront des avancées médicales apportées par la recherche sur les cellules souches [8] 。
La recherche sur les cellules souches embryonnaires humaines est controversée aux États-Unis。2001Année，L’ancien président américain George W. Bush a limité le financement fédéral à la recherche existante sur les cellules souches embryonnaires.。L'actuel président Obama a levé les restrictions ci-dessus par le biais d'un décret en 2009.，Obama estime que « les États-Unis ont fait le mauvais choix en matière de recherche sur les cellules souches embryonnaires humaines »，En conséquence, certains des meilleurs scientifiques sont obligés de mener des recherches pertinentes dans d’autres pays.。La politique d'Obama soutient fermement les scientifiques menant des recherches sur les cellules souches embryonnaires，Cela reflète pleinement le fait que la politique scientifique doit être fondée sur la science.，Ainsi, les États-Unis devraient occuper une position de leader dans le domaine des sciences de la vie. [9] 。Les National Institutes of Health ont ensuite publié cette année-là des réglementations pour la recherche sur les cellules souches embryonnaires.。 [8]
de nouvelles orientations de recherche
En raison des obstacles tels que le rejet immunitaire et les dilemmes éthiques liés à l'application médicale des cellules souches embryonnaires,，Les scientifiques tentent d'autres moyens de remplacer les cellules souches embryonnaires。Les scientifiques tentent d'utiliser la reprogrammation cellulaire pour convertir les cellules somatiques des patients en cellules souches pour leur propre usage，Les principales branches comprennent le transfert nucléaire，Fusion cellulaire de cellules somatiques de patients et de cellules souches embryonnaires de donneurs，et cellules souches pluripotentes induites。Parmi elles, les cellules souches pluripotentes induites sont apparues au cours des cinq dernières années et ont rapidement reçu une grande attention de la part de la communauté universitaire.。
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