Traitement des cellules souches pour les patients atteints d'une maladie auto-immune par perfusion systémique de cellules souches mésenchymateuses dérivées de tissu adipeux autologue expansé en culture

 

Espérance de vie prolongée, le mode de vie et les changements environnementaux ont provoqué une évolution des maladies dans les pays développés vers une augmentation des maladies dégénératives et auto-immunes. Les cellules souches sont devenues un outil prometteur pour leur traitement en favorisant la réparation des tissus et la protection contre les dommages associés aux attaques immunitaires. Les cellules souches autologues dérivées de patients présentent une option sûre pour ce traitement car elles n'induisent pas de rejet immunitaire et donc plusieurs traitements sont possibles sans aucun risque de sensibilisation allogénique, qui peuvent résulter de greffes allogéniques de cellules souches. Nous rapportons ici les résultats des traitements avec la culture élargie humaine dérivée du tissu adipeux Les cellules souches mésenchymateuses (hAdMSC) de 10 patients présentant des lésions tissulaires auto-immunes associées et des options thérapeutiques épuisées, y compris la perte auditive auto-immune, sclérose en plaque, polymyotite, dermatite atopique et polyarthrite rhumatoïde. Pour traitement, nous avons développé un protocole d'expansion de culture standardisé pour les hAdMSCs à partir de quantités minimales de tissu adipeux, fournir un nombre suffisant de cellules pour des injections répétitives. Des efficacités d'expansion élevées ont été obtenues en routine chez des patients auto-immuns et chez des donneurs âgés sans perte mesurable du profil d'innocuité, stabilité génétique, vitalité et puissance de différenciation, caractéristiques de migration et d'accueil. Bien que les conclusions que l'on puisse tirer des traitements à usage compassionnel en termes d'efficacité thérapeutique ne soient que préliminaires, les données fournissent des preuves convaincantes de l'innocuité et des propriétés thérapeutiques de l'AdMSC administré par voie systémique chez des patients humains sans autre option de traitement. Les auteurs pensent que les AdMSC autologues expansés ex-vivo constituent une alternative prometteuse pour le traitement des maladies auto-immunes. D'autres études cliniques sont nécessaires qui prennent en compte les résultats obtenus à partir d'études de cas comme ceux présentés ici.

introduction

Au 21ème siècle, l'espérance de vie a rapidement progressé, tout comme le nombre de maladies auparavant rares sans traitement. Les thérapies à base de cellules souches sont suggérées pour pouvoir réparer et régénérer les tissus dans les maladies associées à l'âge, changement de mode de vie et d'exposition à l'environnement, comme les maladies auto-immunes et les accidents vasculaires cérébraux. En particulier, Les cellules souches mésenchymateuses (MSC) ont été appliqués pour traiter ces maladies [1–3]. toutefois, le manque de protocoles de culture optimisés pour atteindre un nombre suffisant de cellules, problèmes de sécurité concernant les cellules expansées ex-vivo, la possible réduction de la puissance des cellules souches dérivées de personnes âgées et de patients atteints d'une maladie auto-immune a remis en question les applications cliniques des cellules souches autologues chez ces patients.

Afin d'appliquer le MSC dérivé de tissu adipeux autologue humain (hAdMSC) en milieu clinique, nous avons développé un protocole standardisé pour isoler et étendre la culture AdMSC à partir de quantités minimales de graisse in vitro, atteindre un nombre de cellules suffisant pour de multiples inventions thérapeutiques [4]. Les AdMSC étendus ont maintenu la puissance d'une différenciation efficace indépendamment de l'âge du donneur et de l'état de la maladie [5]. La stabilité génétique confirmée et la sécurité in vivo des hAdMSC expansées ex-vivo dans des modèles animaux et des patients [4] indiquent que les AdMSC de personnes âgées sont applicables pour la thérapie autologue et sont comparables à celles dérivées de jeunes donneurs [5]. en outre, nous avons étudié la capacité de migration des hAdMSCs et leur homing in vivo dans un modèle animal après une perfusion systémique.

Les MSC comprennent un certain nombre de cellules souches dotées d'une capacité inhérente d'auto-renouvellement et d'un potentiel de différenciation pour les lignées mésodermiques et autres lignées embryonnaires, y compris les adipocytes, ostéocytes, chondrocytes, hépatocytes, neurones, cellules musculaires et cellules épithéliales [6–8], en fonction du microenvironnement environnant. Un grand nombre de preuves a démontré que les CSM ont généralement des propriétés immunomodulatrices et anti-inflammatoires [9–12]. Alors que les propriétés de différenciation des MSC semblent dépendre d'indices microenvironnementaux in vivo, les effets immunomodulateurs semblent plutôt intrinsèques et présentent donc une base intéressante pour le traitement des maladies auto-immunes et inflammatoires par perfusion systémique. de plus, les propriétés intrinsèques du MSC ont démontré la sécrétion de divers facteurs, modulation de l'environnement local et activation des cellules progénitrices endogènes [13, 14]. D'où, La thérapie MSC a évoqué des promesses thérapeutiques pour la maladie du greffon contre l'hôte (GVHD), le lupus érythémateux disséminé (ELS), la polyarthrite rhumatoïde (DEHORS), sclérose en plaque (MME), Diabète, infarctus du myocarde, thyrodite et différents types de troubles neurologiques, entre autres [15–23].

Diverses voies d'administration des MSC, y compris intraveineux (i.v.) [24], intra-artériel [25] ou intracérébrale [26] ont été signalés pour l'application de cellules souches. De ces itinéraires, i.v.. est une stratégie pratique pour administrer des cellules et des effets thérapeutiques au site de la lésion. Le MSC injecté par voie intraveineuse peut être temporairement piégé dans les poumons, séquestré dans la rate, et sont principalement éliminés par les reins [27]. L'accumulation initiale de MSC dans les poumons peut induire la sécrétion d'effecteurs anti-inflammatoires secondaires [28].La récente démonstration des propriétés de ralliement in vivo des MSC et AdMSC dérivés de la moelle osseuse a encore stimulé i.v.. application de MSC pour la thérapie [29]. Dans cette revue, nous décrivons plusieurs cas d'application d'AdMSC autologues dans des conditions auto-immunes, y compris la perte auditive auto-immune, MME, polymyotite (PM), la dermatite atopique (UN D) et RA. Nous suggérons que des perfusions multiples d'AdMSC peuvent établir une homéostasie immunitaire sur de longues périodes de temps.

Phénotype et potentiels de différenciation des CSM

Des critères minimaux ont été proposés pour définir les CSM par le Mesenchymal and Tissue Stem Cell Committee de l'International Society for Cellular Therapy. Ceux-ci sont: 1) capacité d'adhérence plastique; 2) manque de marqueurs hématopoïétiques, comme le CD45, CD34, CD14, CD11b, CD79a, CD 19, ou HLA-DR; 3) puissance de différenciation mésodermique tripotentielle en ostéoblastes, chondrocytes, et adipocytes; et 4) capacité immunomodulatrice [30]. En plus de leur capacité de différenciation mésodermique, Il a également été démontré que les CSM se différencient in vitro dans la lignée ectodermique telle que les neurones, mais aussi dans la lignée endodermique comme les myocytes et les hépatocytes [7, 31]. Les conditions de différenciation des CSM greffées in vivo pourraient être plus complexes et régulées par des clusters microenvironnementaux de tissus locaux. Par exemple, Les CSM greffées dans le cœur pourraient se différencier en cardiomyocytes, Cellules musculaires lisses, et les cellules endothéliales vasculaires [32–34]. en outre, par une série de signaux provenant des tissus locaux, les CSM greffées peuvent être induites à sécréter diverses cytokines qui possèdent des fonctions trophiques et immunomodulatrices et contribuent par la suite à la réparation et à la régénération des tissus [11].

Sources de MSC
Les CSM ont d'abord été isolées en tant qu'unités formant des colonies de fibroblastes (UFC-F) ou cellules stromales de la moelle osseuse de la moelle osseuse (BMMSC) par Friedenstein et ses collègues [35]. Leur nom le plus courant est basé sur leur propriété de se différencier en une variété de tissus mésodermiques, y compris les os, cartilage et graisse. Des CSM ont été trouvées dans divers organes et tissus, y compris la graisse, périoste, membrane synoviale, liquide synovial, muscle, derme, Les dents caduques, péricytes, os trabéculaire, coussinet adipeux infrapatellaire, cartilage articulaire, cordon ombilical et sang de cordon [36, 37], et placenta [38].

Les BMMSC ont d'abord été appliqués pour la thérapie [39, 40]. toutefois, aspirer la BM du patient est une procédure invasive qui ne produit qu'un faible nombre de cellules (À propos 1-10 par 1 × 105 ou 0.0001-0.01% de toutes les cellules nucléées BM), nécessitant des taux d'expansion élevés [41]. en outre, le potentiel thérapeutique des BMMSC peut être diminué avec l'augmentation de l'âge du donneur et est associé à une diminution de la capacité de différenciation et à une diminution de la vitalité in vitro [42]. Dans tous les cas, pour la transplantation autologue, les BMMSC et AdMSC étendus ont été appliqués en toute sécurité dans de nombreuses études humaines [4, 39, 40].

Cellules souches mésenchymateuses adipeuses
Le tissu adipeux est une source intéressante de CSM pour les autologues thérapie par cellules souches, parce que le tissu adipeux peut facilement être obtenu en quantités suffisantes en utilisant une procédure mini-invasive [23, 43]. en outre, les tissus adipeux contiennent plus de CSM que de BM (À propos 100, 000 MSC par gramme de graisse) [44]. de plus, la différenciation et les pouvoirs immunomodulateurs des AdMSC sont équivalents à ceux des BMMSC [23].

L'efficacité des AdMSCs dans le traitement de diverses maladies a été rapportée in vivo [45]. Il a été rapporté que l'administration locale ou systémique d'AdMSCs avait une capacité de réparation dans l'infarctus du myocarde [19] lésion hépatique [24], lésions cérébrales induites par l'hypoxie-ischémie [46], rhinite allergique [47] et dystrophie musculaire [48]. en outre, Les AdMSC sont des régulateurs immunitaires et potentiellement adaptés au traitement des maladies liées au système immunitaire, notamment la GVHD [15], MME [16], maladie rhumatismale [17, 18] et thyroïdite [20].

Mise en place d'une procédure standard d'expansion de la culture des hAdMSC pour les applications cliniques
En raison du petit nombre de MSC dans les tissus, l'expansion ex vivo est nécessaire pour générer les quantités de cellules requises pour obtenir des résultats thérapeutiques avec les CSM grâce à l'administration systémique. En cas de BMMSC, toutefois, la culture à long terme altère la qualité des MSC, y compris les changements morphologiques, expression atténuée de marqueurs de surface spécifiques, capacité proliférative réduite, potentiel de différenciation [49–52], et activité trophique [53].

Pour produire un nombre suffisant de hAdMSCs pour thérapie par cellules souches, des conditions de culture optimisées ont été développées [4], qui permettent la prolifération de hAdMSC à partir de quantités minimales de graisse, car de grandes quantités de graisse sont rarement obtenues chez des patients souffrant de maladies incurables. L'utilisation d'une canule spéciale maximise le taux de survie des cellules souches dans les tissus adipeux et un 3 taux de fixation précoce de cellules souches plus élevé par rapport à d'autres dispositifs. La collection cellulaire développée, le protocole de culture et d'expansion nécessite moins de 5 g de matières grasses pour obtenir plus de 109 cellules (après 3 passages). Améliorer la prolifération et la différenciation des AdMSC, nous avons testé plus de 15 des milieux de culture disponibles dans le commerce et a finalement développé les milieux de culture hAdMSC, nommé RCME (Support de pièce jointe MSC) et RKCM (Milieu de prolifération MSC) [4]. Ces médias offrent une grande viabilité, temps de doublement raccourcis, maintien de la morphologie et amélioration de la puissance.

Les caractéristiques, stabilité, toxicité, et la tumorigénicité des hAdMSCs développées en culture ont été déterminées chez l'animal et dans des études humaines [4]. En ce qui concerne la sécurité des cellules souches développées en culture in vitro, génétiquement stabilité et cohérence sur le plan morphologique, immunophénotypique, et caractéristiques de différenciation, ainsi que la toxicité et la tumorigénicité doivent être vérifiés. Nous avons démontré que les hAdMSC en culture montraient l'immunophénotype typique et la capacité de différenciation des MSC [4]; cellules exprimées marqueurs MSC CD90, CD105, CD44 et CD29, mais n'a pas exprimé de marqueurs hématopoïétiques ou endothéliaux (CD31, CD34 et CD45) et différenciée à adipogène, ostéogénique, neurogène, lignées myogéniques et chondrogéniques in vitro. Les hAdMSCs développées en culture étaient génétiquement stables pendant au moins 12 passages déterminés par le caryotype et le polymorphisme d'un seul nucléotide (SNP) dosages.

Les cellules en suspension dans du sérum physiologique ont conservé leurs propriétés MSC, viabilité et puissance dans des conditions de stockage au froid (2 à 8°C) pour au moins 72 h, une période critique pour l'expédition des cellules souches dans la clinique. toutefois, nous avons remarqué que les vibrations physiques pendant l'expédition pouvaient avoir un impact négatif sur la viabilité des cellules. Aucune preuve de bactérie, fongique, ou une contamination par des mycoplasmes a été observée dans les cellules testées avant l'expédition et la viabilité cellulaire évaluée par exclusion au bleu trypan a été > 95% avant la transplantation cellulaire.

Sécurité in vivo des hAdMSCs expansés
Pour tester la toxicité des hAdMSCs, différentes doses cellulaires ont été injectées par voie intraveineuse chez des immunodéficients immunodéficients combinés sévères (SCID) souris, et les souris ont été observées pendant 13 semaines. Même à la dose cellulaire la plus élevée (2.5 × 108 cellules/kg de poids corporel), mice showed no sign of discomfort. Although the safety of i.v. injection of culture expanded autologous and allogenic MSCs has been confirmed in patients [54] in numerous human clinical studies including osteogenesis imperfect [55], metachromatic leukodystrophy [56], acute myocardial infarction [57] and GVHD [58], there were some reports presenting that MSCs can induce sarcoma [59] or facilitate the growth of tumors [60]. In order to test tumorigenicity of hAdMSCs, we performed a tumorigenicity test in Balb/c-nude mice for 26 semaines. Même à la dose cellulaire la plus élevée (2 × 108 MSCs/kg, subcutaneous injection), no evidence of tumor development was found. The safety of hAdMSCs was further investigated in a phase I human clinical trial, with no serious adverse event after i.v. administration of 4 × 108 hAdMSCs within an observation period of 12 semaines [4]. The minor adverse events found are common to spinal cord injury patients and disappeared spontaneously or were alleviated with medication. One idiopathic case of asymptomatic hyperthyroidism that did not require medical treatment remained sustained during follow-up. Based on these studies, we conclude that the systemic administration of hAdMSCs is safe and does not induce tumor development. In line with these data, Vilalta et al. [61] reported that hAdMSCs implanted in mice tended to maintain a steady state, and no detectable chromosomal abnormalities or tumors formed during the 8 months of residence in the host’s tissues. Notamment, the development of sarcoma in the study of Tolar et al was due to cytogenetically abnormal culture-expanded MSCs [59]. en outre, Izadpanah et al. [62] demonstrated that long-term cultivation of MSC beyond passage 20 peut entraîner leur transformation en cellules malignes. Ces résultats indiquent qu'il est essentiel de contrôler la stabilité génétique des cellules développées en culture.

Comparaison de la différenciation des cellules neurales de hAdMSC dérivé de donneurs jeunes et âgés
Parce que de nombreuses maladies candidates à la thérapie par cellules souches sont des maladies dégénératives associées à l'âge, les cellules souches obtenues à partir de personnes âgées à des fins autologues devraient être puissantes afin d'avoir des effets thérapeutiques. En termes de BMMSC, il y a eu des résultats controversés concernant les effets du vieillissement. Utilisation de BMMSC humains provenant de juvéniles et d'adultes ensemencés sur des échafaudages tridimensionnels, Mendès et al. [63] ont démontré que la formation osseuse réelle diminuait de manière significative à mesure que l'âge du patient augmentait. Huibregtse et al. [64] a démontré qu'une réduction globale de l'efficacité de la formation de colonies a été observée chez les lapins BMMSC dérivés d'animaux plus âgés. Bergman et al. [65] ont démontré que des différences dans les taux de prolifération basale ont été observées entre les jeunes et les vieux BMMSC isolés de souris, alors que la production de marqueurs précoces de la différenciation ostéoblastique in vitro était équivalente. Stenderup et al. [42] ont montré que les BMMSC humains isolés de donneurs plus âgés ont une durée de vie réduite et le taux de doublement de la population, tandis que les deux BMMSC ont formé des quantités similaires d'os à la fois in vitro et in vivo [51].

Les MSC dérivés de tissus adipeux ne semblent pas subir le même schéma de sénescence que les BMMSC [66, 67]. Lorsque les hAdMSC étaient dérivés de personnes âgées (moyenne 71.4 années) et jeunes donateurs (moyenne 36.4 années), les cellules des deux groupes d'âge ont montré une prolifération similaire, modèles de marqueurs de différenciation ostéogénique et de sénescence, tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite, tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite [66]. tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite, tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite, tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite [67]. tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite, tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite, tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite [5]. tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite, tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite, tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite. tandis que les BMMSC des mêmes cohortes ont montré une prolifération réduite thérapie par cellules souches of age-dependent neural disease with the same stem cell quality and ability as stem cells derived from younger patients.

Distribution, migration and homing potential of transplanted MSCs after intravenous injection
Distribution of MSCs after i.v. injection
After i.v. delivery, MSCs are generally found at low or very low frequencies in most target organs, as shown by histology, polymerase chain reaction or by immunohistochemistry [68–70]. Deak et al. [71] performed systematic kinetic assessments in non-injury models using enhanced green fluorescent protein transfected murine MSCs. They demonstrated that 24 hr after MSC application, the most frequently positive organs were lungs, le foie, rein, peau, and gut among investigated tissues. In baboons, Devine et al. [69] demonstrated that high concentration of transplant specific DNA was observed in gastrointestinal tissues. They also showed that kidney, lung, le foie, thymus, and skin have relatively high amounts of DNA equivalents. Based on their studies, levels of engraftment in these tissues were estimated, ranging from 0.1 à 2.7%, with similar results with autologous and allogeneic cells [69]. After systemic administration, Lee et al. [28] found 80% of the infused MSCs in the lungs of mice 15 min after infusion, whereas after 4 days the specific signal for the presence of human MSCs decreased to 0.01%. Of importance, clinical studies with systemically delivered human MSCs did not induce significant intolerance symptoms from the pulmonary or circulatory systems, while murine MSCs displayed a somewhat different behavior. Deak et al. [72] have demonstrated in a C57BL/6 syngenic murine MSCs transfusion model, that in contrast to human MSCs, murine MSCs home to lungs and might clog in the lungs.

Migration and homing potential of MSCs after i.v. injection
A number of in vivo studies have shown that systemically infused MSCs could migrate to injured, inflamed tissues and exert therapeutic effects [73, 74]. BMMSCs intravenously delivered to rats following myocardial infarction localize in the infarct region and improve ventricular function, while MSCs delivered to non-infarcted rats localize to the BM [75]. Localized abdomen irradiation significantly enhances MSC homing specifically to radiation-injured tissues in mice [76]. A recent study demonstrated the homing properties of i.v. administered hAdMSCs to cell-damaged areas in an allergic rhinitis animal model [47]. The relative organ distribution of fluorescence-labeled hAdMSCs was assessed by us in brain, moelle épinière, rate, thymus, rein, le foie, lung, and heart after i.v. injection in spinal cord injury rats by fluorescence microscopy and human specific Alu PCR. In the injured region of spinal cord, a relatively high percentage of AdMSCs (13%) was found, while most cells remained in spleen (40%) and thymus (21%) [data not shown].

Numerous studies showed the involvement of chemokines or growth factors in MSCs trafficking to the injury region. The interactions of stromal cell-derived factor-1α (SDF-1α)- and C-X-C chemokine receptor type 4 (CXCR4) mediated the trafficking of transplanted BMMSCs in a rat model of left hypoglossal nerve injury. en outre, BMMSCs were attracted by chemokines that are presented in the supernatants of primary cultures of human pancreatic islets culture in vitro and in vivo[77]. When we compared soluble factors by in vitro migration assay, platelet derived growth factor (PDGF)-AB et facteur de croissance transformant-ß1 (TGF-β1) étaient les plus puissants pour l'activité de migration des hAdMSCs [78]. hAdMSCs pré-stimulés avec le facteur de nécrose tumorale (TNF-α) a montré la plus forte activité migratoire. Lorsqu'il est analysé par cytométrie en flux et amplification en chaîne par transcriptase inverse-polymérase, hAdMSC a exprimé le type de récepteur de chimiokine C-C 1 (RCC1), CCR7, Type de récepteur de chimiokine C-X-C 4 (CXCR4), CXCR5, CXCR6, EGFR (récepteur EGF), FGFR1 (récepteur FGF 1), TGFBR2 (récepteur TGF 2), TNFRSF1A (récepteur TNF 1), PDGFRA (récepteur PDGF A) et PDGFRB (récepteur PDGF B) au niveau des protéines et des ARNm. Cette étude indique que la migration des hAdMSCs est contrôlée par divers facteurs de croissance ou chimiokines. D'où, la modulation de la capacité de ralliement des hAdMSCs in vivo pourrait stimuler sa migration dans les sites blessés après i.v.. administration, et ainsi améliorer leur potentiel thérapeutique.

Immunomodulation et effets anti-inflammatoires par les CSM
Plusieurs caractéristiques peuvent jouer un rôle dans la capacité de régulation immunitaire et les effets anti-inflammatoires des CSM: 1) Les CSM ont une faible immunogénicité en raison des faibles niveaux d'expression du complexe majeur d'histocompatibilité-I (CMH-I) et aucune expression des molécules du CMH-II et des molécules de costimulation, y compris B7-1 (CD80), B7-2 (CD86), ou CD40 [79], (2) Les CSM sécrètent des facteurs solubles tels que l'interleukine (LES)-6 et facteur de stimulation des colonies de macrophages [80] et supprimer l'activation et la prolifération des lymphocytes T et B, et interférer avec la différenciation, maturation et fonction des cellules dendritiques, (3) Les MSC libèrent des molécules anti-inflammatoires et anti-apoptotiques et peuvent donc protéger les tissus endommagés [79, 81].

En raison de ces propriétés, La transplantation de MSC a été utilisée pour le traitement de la GVHD, et plusieurs maladies auto-immunes, y compris la thyrodite auto-immune [20], DEHORS [17, 18] et MS [16] and implicated for allogeneic stem cell transplantation. Systemic infusion of AdMSCs controlled lethal GVHD in mice transplanted with haploidentical hematopoietic stem cell grafts when the MSCs were injected early after transplantation [15] although ongoing clinical studies with allogeneic BMMSC were not successful. Therapeutic efficacy of BMMSCs was reported in the animal model of MS [16]. In this experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) model, i.v.. infusion of MSCs decreased clinical symptoms when MSCs were injected before or at the onset of the disease. In an experimental collagen-induced arthritis (CIA) study, a single intraperitoneal injection of BMMSCs prevented the occurrence of severe arthritis, and was associated with a decrease in serum levels of pro-inflammatory cytokines [18]. Il a été démontré que les AdMSC humains améliorent la thyroïdite auto-immune expérimentale via une régulation à la baisse des cytokines Th1 [20]. Il a été démontré que les AdMSC humains améliorent la thyroïdite auto-immune expérimentale via une régulation à la baisse des cytokines Th1, Il a été démontré que les AdMSC humains améliorent la thyroïdite auto-immune expérimentale via une régulation à la baisse des cytokines Th1 [20]. Il a été démontré que les AdMSC humains améliorent la thyroïdite auto-immune expérimentale via une régulation à la baisse des cytokines Th1, Il a été démontré que les AdMSC humains améliorent la thyroïdite auto-immune expérimentale via une régulation à la baisse des cytokines Th1 [82]. en outre, Il a été démontré que les AdMSC humains améliorent la thyroïdite auto-immune expérimentale via une régulation à la baisse des cytokines Th1 [83], Il a été démontré que les AdMSC humains améliorent la thyroïdite auto-immune expérimentale via une régulation à la baisse des cytokines Th1 [84] Il a été démontré que les AdMSC humains améliorent la thyroïdite auto-immune expérimentale via une régulation à la baisse des cytokines Th1 [85]. Il a été démontré que les AdMSC humains améliorent la thyroïdite auto-immune expérimentale via une régulation à la baisse des cytokines Th1 [86], Il a été démontré que les AdMSC humains améliorent la thyroïdite auto-immune expérimentale via une régulation à la baisse des cytokines Th1 [87].

Whether MSC derived from patients with autoimmune diseases will have therapeutic functions after autologous transplantation in a clinical situation is controversial and has not been addressed clinically [88]. Papadaki et al. [89] showed that while BMMSCs isolated from RA patients were found to be impaired in their ability to support hematopoiesis, BMMSCs isolated from MS patients displayed normal ability [89, 90]. Other data demonstrated that BMMSCs derived from patients with RA, MME, autoimmune SLE, systemic sclerosis (SSc) and Sjogren’s syndrome retained their immunomodulatory capabilities in vitro [91, 92].

Clinical application of MSCs in autoimmune diseases
Given their confirmed in vivo safety and the rationale that MSCs possess immunomodulatory and anti-inflammatory properties, compassionate-use treatments for autoimmune diseases were initiated in patients after other treatment options were exhausted. All patients provided informed consent to the treatment. Here, we describe treatment of AdMSCs in autoimmune hearing loss (AIED), MME, PM, AD and RA. Details on the patients disease and treatment histories, disease status and treatments are provided in Table 1 and Additional File 1; Case Reports, Table S1 and Figure S1. Additional clinical scores for AD before and after treatment are shown in Table 2. Patient analysis was based mostly on clinical parameters. Dans certains cas, immunological and blood status parameters were also measured (cases 3, 4, 5, 8, 9, 10); all cases showed decrease in inflammatory responses and eosinophil counts.

Table 1 Summary of hAdMSC treatments of 10 patients with different autoimmune-associated diseases.

Table 2 SCORing results of AD patients.

For all treatments, 5 g of fat tissues were collected by liposuction, transferred immediately to the GMP facility and Stem Cell Research Center of RNL BIO and culture-expanded for 3 passages using the standard protocol to obtain AdMSCs [4]. The patients received between 1 et 6 i.v.. infusions of 200 million AdMSCs suspended in physiological saline (chaque 100 million cells/100 ml) in different intervals (see Table 1 and Additional File 1; Case Reports). Two patients received additional intrathecal (MS-patient) and intrarticular (RA-patient) injections of cells (Table 1 and Additional File 1; Case Reports and Table S1).

Conclusion
Human AdMSC can be isolated from small amounts of adipose tissue, efficiently expanded to achieve more than 109 cells after 3 à 4 passages independent on donor age and disease status. The sustained potency and genetic stability of the cells make adipose tissue a very attractive source for multipotent cells. Their immunmodulatory function, homing and migratory patterns as well as previous clinical trials suggest that these cells are efficient for treatment for several classes of autoimmune diseases and their application is safe. Here, we demonstrated considerable therapeutic effects of culture-expanded autologous AdMSCs in a variety of autoimmune diseases in the frame of an ethically justified compassionate use application for patients with exhausted therapeutic options. Multiple intravenous infusions of cells resulted in clinical benefit in all treated patients in the follow up period. No adverse events were observed. The data provide first evidence for clinical benefit in autoimmune diseases, un examen plus approfondi dans des essais cliniques contrôlés avec un nombre suffisant de patients est nécessaire pour tirer une conclusion définitive sur l'efficacité thérapeutique et les avantages à long terme. un examen plus approfondi dans des essais cliniques contrôlés avec un nombre suffisant de patients est nécessaire pour tirer une conclusion définitive sur l'efficacité thérapeutique et les avantages à long terme, un examen plus approfondi dans des essais cliniques contrôlés avec un nombre suffisant de patients est nécessaire pour tirer une conclusion définitive sur l'efficacité thérapeutique et les avantages à long terme 1 × 109 un examen plus approfondi dans des essais cliniques contrôlés avec un nombre suffisant de patients est nécessaire pour tirer une conclusion définitive sur l'efficacité thérapeutique et les avantages à long terme, un examen plus approfondi dans des essais cliniques contrôlés avec un nombre suffisant de patients est nécessaire pour tirer une conclusion définitive sur l'efficacité thérapeutique et les avantages à long terme. en outre, un examen plus approfondi dans des essais cliniques contrôlés avec un nombre suffisant de patients est nécessaire pour tirer une conclusion définitive sur l'efficacité thérapeutique et les avantages à long terme, un examen plus approfondi dans des essais cliniques contrôlés avec un nombre suffisant de patients est nécessaire pour tirer une conclusion définitive sur l'efficacité thérapeutique et les avantages à long terme, un examen plus approfondi dans des essais cliniques contrôlés avec un nombre suffisant de patients est nécessaire pour tirer une conclusion définitive sur l'efficacité thérapeutique et les avantages à long terme. un examen plus approfondi dans des essais cliniques contrôlés avec un nombre suffisant de patients est nécessaire pour tirer une conclusion définitive sur l'efficacité thérapeutique et les avantages à long terme.

Bien qu'il soit montré ici que la technologie de traitement des maladies auto-immunes à l'aide d'AdMSC autologue est en place et que les attentes dérivées des études précliniques peuvent être confirmées, il y a encore une compréhension limitée des modes d'action. En conclusion, la perfusion systémique de cellules souches autologues décrite ici offre la promesse d'une meilleure gestion d'un large éventail de maladies auto-immunes, indépendant de l'âge du patient.

thérapie par cellules souches