Otizm Spektrum Bozukluğu Olan Küçük Çocuklarda Otolog Kordon Kanı İnfüzyonları Güvenli ve Uygulanabilir: Tek Merkezli Faz I Açık Etiketli Araştırmanın Sonuçları

Erken tanı ve davranışsal tedavilerdeki gelişmelere rağmen, otizm spektrum bozukluğu olan çocuklar için daha etkili tedaviler (OSB) ihtiyaç var. Göbek kordonu kanından türetilen hücre tedavilerinin beyindeki inflamatuar süreçleri modüle ederek OSB semptomlarını hafifletme potansiyeline sahip olabileceğini varsaydık.. Buna göre, bir aşama I gerçekleştirdik, otolog göbek kordon kanının tek bir intravenöz infüzyonunun güvenliğini ve uygulanabilirliğini değerlendirmek için açık etiketli çalışma, çeşitli OSB değerlendirme araçlarındaki değişime duyarlılığın yanı sıra, gelecekteki denemeler için uygun son noktaları belirlemek. Yirmi beş çocuk, medyan yaş 4.6 yıllar (aralık 2,26–5,97), Doğrulanmış ASD tanısı ve nitelikli banka otolog göbek kordon kanı ünitesi ile, kayıtlıydı. Çocuklar kordon kanı infüzyonundan hemen önce bir dizi davranışsal ve fonksiyonel testle değerlendirildi. (temel çizgi) Ve 6 Ve 12 aylar sonra.

12 aylık dönem boyunca advers olayların değerlendirilmesi tedavinin güvenli olduğunu ve iyi tolere edildiğini gösterdi. Sosyal iletişim becerileri ve otizm belirtilerine ilişkin ebeveyn raporu ölçümlerinde çocukların davranışlarında önemli iyileşmeler gözlemlendi, Genel otizm semptom şiddeti ve iyileşme derecesine ilişkin klinisyen derecelendirmeleri, İfade edici kelime dağarcığının standartlaştırılmış ölçümleri, ve çocukların sosyal uyaranlara olan dikkatine ilişkin nesnel göz izleme ölçümleri, bu önlemlerin gelecekteki çalışmalarda yararlı son noktalar olabileceğini belirten.

İlk dönemde davranışsal iyileşmeler gözlendi 6 infüzyondan aylar sonra ve başlangıçta daha yüksek sözel olmayan zeka katsayılarına sahip çocuklarda daha yüksekti. Bu veriler OSB'li çocuklarda göbek kordon kanı infüzyonunun etkinliğini belirlemek için gelecekteki çalışmalara temel oluşturacaktır.. Kök Hücre Translasyonel Tıp 2017;6:1332–1339

_______________________________

Reklamcılık:

Avrupa'da Kök Hücre Tedavisi kliniği

_______________________________

Önem Beyanı
Bu aşama I çalışması, otizm spektrum bozukluğu olan küçük çocuklarda otolog göbek kordon kanı infüzyonlarının gerçekleştirilmesinin güvenli ve uygulanabilir olduğunu göstermekte ve gelecekteki denemelerde kullanılmak üzere ümit verici birkaç sonuç ölçütünü tanımlamaktadır..

giriiş
Otizm spektrum bozukluğu (OSB) sosyal iletişimde bozulma, tekrarlayan davranışlar ve sınırlı aktivite aralığı ile karakterize nörogelişimsel bir bozukluktur., yaşamın erken dönemlerinde başlayan. ASD'nin yaklaşık olarak etkileyeceği tahmin edilmektedir. 1 içinde 68 ABD'deki çocuklar. 1. OSB'li bireylerin çoğunluğu bağımsız yaşayamaz ve yaşam boyu destek veya konaklamaya ihtiyaç duyar. Buna göre, OSB'li bir bireyi desteklemenin yaşam boyu maliyetinin şu şekilde olduğu tahmin edilmektedir: $1.4 milyon. Maliyet: $2.4 aynı zamanda zihinsel engelli olanlar için milyon 2.

ASD için tedavi yaklaşımları ilaç tedavisini içerir, davranış terapisi, mesleki ve konuşma terapileri, ve uzmanlaşmış eğitim ve mesleki destek. Erken yoğun davranışsal müdahale, önemli ölçüde iyileştirilmiş sonuçlarla ilişkilidir 3, ama böyle bir müdahaleye rağmen, OSB'li birçok kişi önemli ölçüde engelli olmaya devam ediyor. Şu anda mevcut olan tüm tıbbi tedaviler, psikotrop ilaçlar gibi, ilişkili eşlik eden semptomları iyileştirmeyi amaçlamaktadır, sinirlilik gibi, ancak temel otizm semptomlarına değinmeyin. Bunun ışığında, OSB'nin temel semptomlarını hedef alan daha etkili tedavilere karşı karşılanmamış büyük bir ihtiyaç var.

OSB etiyolojisine hem genetik hem de çevresel faktörler katkıda bulunmaktadır. 4-6. Patofizyolojisi kesin olarak bilinmemekle birlikte, gözlemler beyin bölgelerindeki anormal sinaptik işleyişi de içermektedir. 7, 8, beyaz madde anormallikleri 9, ve nöroinflamasyon 10. OSB'li hastaların beyinlerindeki bağışıklık patolojisinin patogenezi, bağışıklıkla ilişkili gen ağlarının aşırı ekspresyonundan kaynaklanıyor olabilir 11, fetal beyin dokusuna karşı anne antikorlarının varlığı 12, proinflamatuar sitokinlerin atipik seviyeleri (IL-6, TNF-α) beyin omurilik sıvısında 13, ve anormal nöral bağlantı yollarına yol açan aşırı mikroglial aktivasyon 14, 15. Gibi, Bağışıklık modülasyonunu veya sinirsel bağlantının düzenlenmesini etkileyen terapötik yaklaşımlar, bu popülasyona yönelik yeni tedaviler için mantıksal hedeflerdir. Klinik öncesi modeller göbek kordon kanının efektör hücreler içerdiğini göstermiştir., parakrin sinyalleme yoluyla, beyin bağlantısını değiştirir ve aynı zamanda iltihabı bastırır 16, 17. Otolog kordon kanı hücrelerinin infüzyonlarının serebral palsili ve diğer edinilmiş beyin yaralanmalı hastalarda güvenli olduğu gösterilmiştir. 18-20. Otolog kordon kanı hücrelerinin infüzyonlarının OSB tedavisinde önemli bir rol oynayabileceğini varsaydık ve tek merkezde yürüttük., açık etiketli, Genç pediatrik katılımcılarda aşama I güvenlik ve fizibilite çalışması. Çalışmada şunlara odaklanıldı: (A) otolog göbek kordon kanının tek bir intravenöz infüzyonunun güvenliği ve (B) OSB'li küçük çocuklarda çeşitli farklı değerlendirme araçlarının değişime duyarlılığı ve uygulanmasının uygulanabilirliği.

Malzemeler ve Yöntemler
Çalışma Tasarımı ve Genel Bakış
Bu çalışma I. Aşamaydı, tek merkezli, otolog göbek kordon kanının tek bir intravenöz infüzyonunun açık etiketli denemesi 25 OSB'li çocuklar. Tüm çocuklar başlangıçta bankadaki kordon kanı üniteleri hakkında tıbbi kayıtlar ve bilgi almak için bir tarama protokolüne kaydoldu.. Tüm katılımcıların bakıcıları, telefonla ön çalışma tarama görüşmesini tamamladı ve tıbbi kayıtlar ile videoları, denemeye uygunluğun belirlenmesi için çalışma ekibinin incelemesine sundu.. ASD tanısı doğrulanmış ve nitelikli banka otolog göbek kordon kanı ünitesine sahip çocuklar katılmaya hak kazandı.. Araştırmanın hem tarama hem de tedavi aşamaları için yazılı bilgilendirilmiş onam alındı. Deneme Duke Hastanesi Kurumsal İnceleme Kurulu tarafından onaylandı ve IND kapsamında yürütüldü. #15949.

Katılımcılar ve onların bakıcıları, çalışmaya katılımlarının bir parçası olarak üç kez Duke Üniversitesi'ne gittiler. Temel ziyaretlerinde, değerlendirildiler ve tek bir intravenöz otolog kordon kanı infüzyonu aldılar. Şu tarihte: 6 Ve 12 infüzyondan aylar sonra, katılımcılar takip klinik değerlendirmeleri için geri döndüler. Bakıcılarla ek görüşmeler ve anketler şu adreste toplandı: 3 Ve 9 infüzyondan aylar sonra.

Katılımcılar
Katılımcılar arasında 2 Ve 5 Ruhsal Bozuklukların Tanısal ve İstatistiksel El Kitabı'na göre OSB'nin klinik tanısı için kriterleri karşılayan yaş, Beşinci Baskı (DSM-5) 21 çalışmaya dahil edilmeye hak kazandılar. OSB'nin DSM-5 tanısı uzman klinisyenler tarafından belirlendi ve Otizm Tanısal Gözlem Çizelgesi tarafından bilgilendirildi. (TAMAM), İkinci Basım 22 ve Otizm Tanı Röportajı, Revize edildi (ADI-R) 23. Ek dahil etme kriterleri dahil (A) sözsüz zeka bölümü (IQ'su) Stanford-Binet Erken Çocukluk Zeka Ölçeğinde  ≥ 35, Beşinci Baskı 24 veya Mullen Erken Öğrenme Ölçekleri 25, (B) Nitelikli bir otolog göbek kordon kanı ünitesinin mevcudiyeti, (C) katılımcı en azından mevcut ilaçları konusunda stabildi 2 infüzyondan aylar önce, (D) Duke Üniversitesi'ne üç kez seyahat etme yeteneği (temel ve 6 Ve 12 başlangıçtan sonraki aylar), Ve (e) ebeveynler İngilizce konuşuyordu. Hariç tutma kriterleri dahil (A) önceki hücre tedavisi öyküsü, (B) intravenöz immünoglobulin veya diğer antiinflamatuar ilaçların kullanımı (NSAID'ler hariç), (C) bilinen genetik (E.G., kırılgan X) veya diğer önemli tıbbi eşlik eden hastalıklar, (D) genetik bir sendromu düşündüren bariz fiziksel dismorfoloji, (e) kontrolsüz nöbet bozukluğu, (F) önemli ölçüde bozulmuş böbrek veya karaciğer fonksiyonu, Ve (G) Tam kan sayımında klinik olarak anlamlı anormallikler.

Göbek Kordon Kanı Üniteleri
Tüm katılımcıların bir ailede veya kamu kordon kanı bankasında hazır bir otolog göbek kordon kanı ünitesine sahip olması gerekiyordu.. Tarama sırasında, potansiyel katılımcıların kordon kanı raporları, aşağıdaki kriyoprezervasyon öncesi kriterleri karşıladıklarından emin olmak için gözden geçirildi: (A) toplam çekirdekli hücre sayısı (TNCC) ≥ 1 × 107/kg, (B) önceden oluşturulmuş ve negatif olan kısırlık kültürleri, (C) Anne donörü veya kordon kanı ürününde test edilen negatif anne bulaşıcı hastalık belirteçleri (minimal düzeyde hepatit B dahil, hepatit C, insan bağışıklık yetersizliği virüsü [HIV], insan T lenfotrofik virüsü [HTLV], ve frengi), Ve (D) ek testler için test örneği mevcuttur. Katılımcının ve kordon kanı ünitesinin uygun olup olmadığı, Kordon kanı ünitesinin bir örneği, güç testi için Duke'a gönderildi 26. Kimlik doğrulaması için hem katılımcıya hem de kordon kanı ünitesi örneğine düşük çözünürlüklü HLA testi uygulandı.. Test numunesindeki CD45 canlılığı >40% ve HLA kimliği doğrulandı, dondurularak saklanan kordon kanı ünitesi kuru bir nakliyeciyle Duke Kök Hücre Nakli Laboratuvarına gönderildi, infüzyon gününe kadar sıvı nitrojen altında saklandığı yer.

Prosedürler
Otolog Göbek Kordon Kanı İnfüzyonu

İnfüzyon gününde, kordon kanı çözüldü ve dekstran 40 + 5% albüminde yıkandı (VE) ve yerleştirildi 1.25 uygulama için ml/kg DA 27. Çözdürülmüş kordon kanı üniteleri TNCC sayımı için test edildi, canlı CD34+ hücreleri, koloni oluşturan birimler (CFU'lar), tripan mavisi yoluyla hücre canlılığı, ve kısırlık kültürleri. Otolog göbek kordon kanı infüzyonu, sakinleştirilmiş beyin manyetik rezonans görüntüleme taramasının ardından gerçekleştirildi. (MR). intravenöz (IV) erişim bir pediatrik anestezi uzmanı tarafından sağlandı. MR tamamlandığında, çocuklar Duke Çocuk Sağlığı Merkezi Gündüz Hastanesine kaldırıldı, ayakta tedavi merkezi, onların infüzyonu için. Benadryl ile premedikasyondan sonra (0.5 mg/kg IV), Solu-Medrol (0.5 mg/kg IV), Ve, Çocuk uyanıksa ve ağızdan ilaç alabiliyorsa, Tylenol (10 mg/kg PO), katılımcılara kordon kanı ünitesinin bir kısmı veya tamamı verildi, 1–5 × teslim edecek şekilde ayarlandı 107 kilogram başına hücre, periferik IV infüzyonu yoluyla 2 ile 30 dakika. İntravenöz sıvılar uygulandı 1.5 için bakım süreleri 30 dakikaya kadar 2 kordon kanı infüzyonundan birkaç saat sonra. İnfüzyon sırasında ve çocuk sedasyondan uyanana kadar yaşamsal belirtiler ve nabız oksimetresi sürekli olarak izlendi..

Güvenlik Değerlendirme Kriterleri
Katılımcılar infüzyon sırasında gözlemlendi ve infüzyon reaksiyonları açısından izlendi. Ek olumsuz olaylar (AE) katılımcıların ebeveynleri/vasileri ile 7-10. günlerde yapılan telefon görüşmeleri yoluyla belirlendi, 3 aylar, Ve 9 infüzyondan aylar sonra, ve başlangıçta şahsen, 6- ve 12 aylık klinik ziyaretleri. Analiz için, Kelimenin tam anlamıyla AE terimleri, Olumsuz Olaylara İlişkin Ortak Terminoloji Kriterleri tarafından tanımlanan standart terminolojiye göre eşleştirildi (CTCAE) versiyon 4.0 ve araştırmacı tarafından değerlendirildiği üzere müdahalenin ciddiyetine ve ilişkisine göre özetlenmiştir..

Klinik Değerlendirmeler
Gelecekteki faz II ve III klinik araştırmalar için bir son nokta olarak hem uygulamanın fizibilitesini hem de faydayı belirlemek için çoklu değerlendirmeler kullanıldı.. Bunlar arasında Vineland Uyarlanabilir Davranış Ölçekleri-II de vardı. (VABS-II), Klinik Küresel İzlenim Ölçeği (CGI), Yaygın Gelişimsel Bozukluk Davranış Envanteri (PDDBI), Anlamlı Tek Kelimeli Resim Kelime Bilgisi Testi-4 (EOWPVT-4), Çocuklarda Davranış Değerlendirmesi-Sosyal Beceriler alt ölçeği, Anormal Davranış Kontrol Listesi, Duyusal Deneyimler Anketi, Tekrarlayan Davranış Ölçeği, Zeka Terazileri (Mullen Erken Öğrenme Ölçekleri veya Stanford-Binet), Dil Ortam Analizi, Okul Öncesi Yaş Psikiyatrik Değerlendirmesi, Anormal Davranış Kontrol Listesi, ATN GI Belirtiler Envanteri, ve Ebeveynlik Stres Endeksi. Ek olarak, üç objektif biyobelirteç toplandı: Sosyal Uyaranların Göz Bakışı Takibi (EGT), EEG, ve beyin MR'ı. EEG ve beyin MR bulguları ayrı ayrı raporlanacak. Birincil davranışsal son nokta olarak önceden seçilen önlemlerin sonuçları (VABS-II Sosyalleşme Alt Ölçeği Standart Puanı) ve temel ikincil davranışsal son noktalar olarak (CGI, PDDBI, EOWPVT) ve EGT biyobelirteçlerinin bu rapora dahil edilmesi.

Vineland Uyarlanabilir Davranış Ölçekleri-II (VABS-II) 28 Çocukların çok çeşitli alanlardaki uyum davranışlarını değerlendirmek için kullanılan bir bakıcı anketidir.. VABS-II, güçlü güvenilirlik ve geçerliliğe sahip, iyi standartlaştırılmış bir ölçümdür. 29-32 bu da genel bir bileşik puan verir, aşağıdaki alanlardaki alt ölçek standart puanlarının yanı sıra: Sosyalleşme, İletişim, Günlük Yaşam Becerileri, ve Motor Beceriler. VABS-II, başlangıçta ve 6 ve 12 aylık ziyaretlerde her katılımcının birincil bakıcısından toplandı. Sosyalleşme Alt Ölçeği Puanı, sosyal davranışın temel OSB belirtisindeki iyileşmeleri ölçmek için kullanıldı..

Klinik Küresel İzlenim (CGI) semptom şiddetini ve tedavi yanıtını veya zaman noktaları arasındaki davranış değişikliğini ölçen, yaygın olarak kullanılan bir derecelendirme ölçeğidir. CGI'nın iki versiyonu kullanıldı: CGI-Önem Düzeyi (CGI-S) ve CGI-İyileştirme (CGI-I). CGI-S, değerlendirme sırasında her katılımcının OSB semptomlarının şiddetini gösteren 7 puanlık bir ölçektir., Uzman değerlendiricinin aynı tanıya sahip katılımcılarla olan geçmiş deneyimine göre. Uzman değerlendiricinin yaşam boyu klinik deneyimine ve mevcut tüm bilgilere dayanmaktadır, her katılımcı şu şekilde derecelendirildi: 1: mevcut değil (ASD yok), 2: ASD belirtileri zar zor belli oluyor, 3: hafif ASD semptomları, 4: orta dereceli ASD semptomları, 5: orta derecede şiddetli OSB belirtileri, 6: Şiddetli OSB belirtileri, veya 7: çok şiddetli OSB belirtileri. Her katılımcıya başlangıçta bir CGI-S derecelendirmesi verildi ve 6 Ve 12 aylık ziyaretler. CGI-I, OSB semptomlarının başlangıca göre iyileşme veya kötüleşme derecesini gösteren 7 puanlık bir ölçektir.. Mevcut tüm bilgilere dayanarak, her katılımcı şu şekilde derecelendirildi: 1: çok gelişti, 2: çok gelişmiş, 3: minimal düzeyde geliştirilmiş, 4: değişiklik yok, 5: minimum düzeyde daha kötü, 6: çok daha kötü, veya 7: çok daha kötü. Her katılımcıya 6 ve 12 aylık ziyaretlerde bir CGI-I derecelendirmesi verildi., and each referenced the degree of improvement or worsening relative to baseline. All CGI‐S and CGI‐I ratings were made by highly experienced clinicians with expertise in ASD.

The PDDBI 33 is a caregiver questionnaire that is designed to measure social behavior, uyarlanabilir işleyiş, and maladaptive functioning in areas typically affected by ASD. The PDDBI was standardized with a sample of caregivers and teachers of children with ASD from a range of racial, ethnic, and socioeconomic backgrounds 34. The PDDBI was collected from each participant’s primary caregiver at the baseline, 6‐ and 12‐month visits, as well as remotely at 3 Ve 9 başlangıçtan sonraki aylar.

The EOWPVT‐4 35 is a clinician‐administered assessment which measures an individual’s ability to match a spoken word with an image of an object, action, or concept. EOWPVT-4 her çocuğa başlangıçta ve 6 ve 12 aylık ziyaretlerde uygulandı..

EGT aracılığıyla sosyal ve sosyal olmayan uyaranlara yönelik görsel dikkati ölçmek için tasarlanmış bir görev uygulandı. EGT, bireylerin bebeklikten yetişkinliğe kadar bakış kalıplarının ölçülmesini sağlayan bir teknolojidir.. EGT donanımı 36 Kornea yansımalarını ölçmek için kızılötesi ışık yayan diyotlar ve kızılötesi kameralar kullanır, gözün bakış yönünü hesaplamak için kullanılır. EGT görevi sırasında, katılımcılar dinamik sosyal uyaranların 4 dakikalık videosunu izlediler, ortak ilgi için teklif sunan bir aktrisin bölümlerini içeren 37. Bu uyaranları kullanma, Önceki araştırmalar, OSB'li küçük çocukların, ortak ilgi arayışı sırasında hem sahnenin tamamına hem de oyuncunun yüzüne karşı dikkatlerinin azaldığını ortaya çıkarmıştı.. Sahnenin tamamına olan ilginin azalması da otizm semptom şiddetiyle ilişkiliydi 37. EGT görevi başlangıçta her çocuğa sunuldu., 6‐ and 12‐month visits.

Çocukların davranışsal faaliyetlere dahil oldukları saat sayısı hakkında bilgi, konuşma dili, mesleki, Çocuğun aldığı diğer davranışsal terapiler ve eğitim hizmetleri başlangıçtan itibaren her üç ayda bir değerlendirildi. 12 Başlangıç ​​seviyesinden sonraki aylarda ebeveynle yapılandırılmış bir Müdahale Geçmişi Görüşmesi yoluyla.

İstatistiksel Yöntemler
Analiz öncelikle tanımlayıcı yöntemlere dayanıyordu, kohortun temel özelliklerinin bir özetiyle başlayarak. Sürekli sonuç ölçümlerinin zaman içindeki dağılımını göstermek için kutu grafikleri hazırlandı.. Sıralı sonuç ölçümlerinin her zaman noktasındaki sıklığı çubuk grafikler kullanılarak çizildi. Sürekli ve sıralı sonuçlar üzerindeki değişimin istatistiksel önemi, PDDBI dışında Wilcoxon işaretli sıralama testi kullanılarak değerlendirildi., düğümlü sabit etkili doğrusal spline kullanılarak modellenmiştir. 3 aylar. Bu model, Akaike Bilgi Kriterleri kullanılarak diğer boylamsal sabit ve rastgele etki modelleri yerine seçilmiştir.. EGT, Genelleştirilmiş Tahmin Denklemleri kullanılarak analiz edildi (vay be) Logit bağlantısı ile, binom hata yapısı, ve değiştirilebilir veya yapılandırılmamış çalışma korelasyonu. Temel yaş ilişkisi, sözsüz IQ, ve infüze edilen hücre dozunun zaman içindeki değişimi ile her analizde Spearman korelasyonu kullanılarak araştırıldı (rs). Cinsiyete göre değişim kalıplarını araştırmak için yeterli sayıda kadın kayıtlı değildi. Nihayet, Benjamini-Hochberg Yanlış Keşif Oranını uygulayarak yanlış pozitif sonuç potansiyelini değerlendirdik (FDR) başlangıçtan 6 aya kadar ve 6 ila 12 ay arasındaki takip dönemleri için gözlemlenen sonuçlara ilişkin prosedür.

Sonuçlar
Katılımcılar
Yirmi beş katılımcı (21 erkekler, 4 dişiler), çoğunluk beyaz (n = 22, 1 Asya, 2 karışık ırk), ortalama yaşla kaydoldular 4.62 yıllar (aralık 2,26–5,97) ve ortalama sözel olmayan IQ'su 65 (aralık 22–123). Katılımcıların çalışmaya girişteki ortalama ADOS karşılaştırma puanı şuydu: 8.0 (aralık 6–10), Ve 72% orta derecede şiddetli veya şiddetli OSB semptomları vardı (Masa 1). Tüm katılımcılar temel ve 6 aylık değerlendirmeleri tamamladı. Üç katılımcı 12 aylık değerlendirmeyi tamamlamadı.

Masa 1. Baseline characteristics of patients and autologous cord blood units (n = 25)
Patient characteristics
Sex, no. (%)
Female 4 (16.0%)
Male 21 (84.0%)
Yaş, yıllar, median (range) 4.62 (2.26–5.97)
Race, no. (%)
White 22 (88%)
Other 3 (12%)
Ethnicity, no. (%)
Hispanic 2 (8%)
Not Hispanic 23 (92%)
ADOS Severity Score, median (range) 8 (6–10)
Nonverbal intelligence quotient, median (range) 65 (22–123)
CGI-S, no. (%)
Barely evident 4 (16.0%)
Moderate ASD symptoms 3 (12.0%)
Moderately severe ASD 10 (40.0%)
Severe ASD symptoms 8 (32.0%)
Cord blood characteristics, median (range)
Total cells infused, ×108 4.42 (1.53–12.28)
Cell dose infused, ×106/kg 25.80 (9.97–80.80)
Viable CD34+ dose infused, ×105/kg 0.3 (0.1–4.2)
CFU dose infused, /kilogram 1,225.50 (85.50–4,620.00)
Kısaltmalar: TAMAM, Autism Diagnostic Observation Schedule; OSB, otizm spektrum bozukluğu; CFU, koloni oluşturan birimler; CGI-S, Clinical Global Impression‐Severity; TNCC, toplam çekirdekli hücre sayısı.
Umbilical Cord Blood Infusions
Autologous umbilical cord blood units were retrieved from two U.S. family cord blood banks and one public bank (n = 1). All were stored in dual compartment bags. 1–5 × hedef hücre dozuna ulaşmak için 107 TNCC/kg, altı katılımcıda kordon kanı ünitesinin tamamı kullanıldı. İçinde 19 katılımcılar, the 80% Kordon kanı ünitesinin bölmesi eritilerek infüzyon için kullanıldı ve geri kalan kısım 20% kısmı dondurularak saklanmış durumda tutuldu ve saklandı, ebeveynlerin izniyle, gelecekteki potansiyel kullanım için. Tüm hastaların kordon kanı infüzyonu tamamlandı. Hastaya verilen eritilmiş kordon kanı ürününün özellikleri Tabloda gösterilmektedir. 1. İnfüze edilen medyan TNCC ve canlı CD34 hücre dozları 2.6 × 107/kg (aralık 1–8 × 107) Ve 0.3 × 105/kg (aralık 0,1–4,2 × 105), sırasıyla. İnfüze edilen medyan CFU'lar 1225,5/kg idi (aralık 85,5–4620). Her ne kadar bu çalışmada kullanılan dozlama kriterleri özel bankanın kordon kanı ünitelerini kullanan önceki çalışmalarımızla tutarlı olsa da, bunlar TNCC, CD34, and CFU values are lower than our prior experience 18. Banka tarafından bildirilen kriyoprezervasyon öncesi kısırlık kültürlerinin negatif olmasına rağmen, bir ünitede Duke'ta çözülme sonrası numunede koagülaz negatif stafilokok üremesi oldu.

Emniyet
Bu açık etiketli aşama I denemesinin birincil son noktası güvenlikti (incir. 1). Daha önce nörolojik bozukluğu olan çocuklarda otolog kordon kanı infüzyonuna ilişkin önceki güvenlik çalışmamızda bildirildiği gibi 18, Otolog kordon kanı infüzyonu iyi tolere edildi. Hiçbir katılımcıda ciddi bir AE rapor edilmedi. Toplam 92 AE'ler rapor edildi 23 katılımcılar (incir. 1) katılımcı başına üç olayın medyanı ile (range: 1–15). Tüm olaylar Hafif olarak derecelendirildi (71 olaylar) veya Orta (21 olaylar). On iki olay (13%) infüzyonla ilişkili olduğu düşünüldü, en yaygın olanı alerjik reaksiyondur, infüzyon gününde meydana gelen ürtiker ve/veya öksürük ile kendini gösterir (5 olaylar 4 katılımcılar; hepsi Hafif; 2 ek bir doz IV Benadryl gerektiren). En yaygın ilgisiz AE'ler ajitasyondu, cilt değişiklikleri, ve tipik çocukluk çağı enfeksiyonları, arasında rapor edildi 2 günler ve 1 infüzyondan sonraki yıl. Hiçbir hastada infüzyona veya kan dolaşımına bağlı enfeksiyon veya ciddi enfeksiyon görülmedi.

Figür 1
Şekil görüntüleyicide açPowerPoint
Olumsuz olayların sıklığı. Bir olayı bildiren hastaların sayısı parantez içinde listelenmiştir.

_______________________________

Reklamcılık:

Avrupa'da Kök Hücre Tedavisi

_______________________________

Davranış Testi
Ayrıca, OSB'li çocuklarda davranışsal sonuçları değerlendirmek için tipik olarak kullanılan çeşitli önlemlerin uygulanmasının fizibilitesini de test ettik ve sonuçlarını açıkladık.. Birden fazla ebeveynin derecelendirdiği ve klinisyenin derecelendirdiği önlemler değerlendirildi. Temel IQ ile ilişkili davranışsal sonuçlar, ancak yaş veya hücre dozu değil. Davranıştaki değişiklikler aynı zamanda davranışsal müdahalelerin saat sayısıyla da ilişkili değildi., konuşma-dil terapisi, Çocuğun çalışma süresi boyunca aldığı mesleki terapi veya eğitim saatleri. Seçilen önlemler, birincil ve anahtar ikincil davranışsal son noktalar (VABS-II, CGI-S, GCI-I, PDDBI, EOWPBT) ve EGT biyobelirteç ölçüsü, gösterilen tüm iyileştirmeler aşağıda açıklanmıştır.

VABS-II, sosyalleşmeyi değerlendiren ebeveyn raporu ölçüsüdür, iletişim, ve uyarlanabilir davranışlar. Figür 2 tüm hastalarda standart puanların dağılımını gösterir (Panel A) ve IQ'ya göre katmanlandırılmış (B Paneli) VABS-II Sosyalizasyon alanı için 24 Değerlendirmeleri her üç zaman noktasında da tamamlayan katılımcılar. Başlangıçtan itibaren standart puanda istatistiksel olarak anlamlı bir artış gözlendi 6 aylar. Bu değişiklik şu andan itibaren istikrarlıydı: 6 ile 12 aylar. Change was positively correlated with nonverbal IQ in the Socialization (rs = .57, 95% CI: 0.20–0.79, p = .004) and Adaptive Behavior (rs = .42, 95% CI: 0.01–0.70, p = .04) domains, but not in the Communication domain (rs = .22, 95% CI: −0.21 to 0.57, p = .31).

Figür 2
Şekil görüntüleyicide açPowerPoint
Vineland Adaptive Behavior Scales‐II (VABS-II) Socialization Standard Score. (A): Distribution of VABS‐II Socialization Standard Score in all participants over time. (B): Distribution of VABS‐II Socialization Score stratified by nonverbal intelligence quotient.

The CGI‐S and –I are clinician‐rated measures used to assess the severity and change in severity of the core symptoms of ASD over time. Figür 3 CGI-S dağılımını gösterir (Panel A) ve CGI-I (B Paneli) içinde 22 tüm zaman noktalarında tamamen değerlendirilebilen katılımcılar. CGI-S'de, başlangıçta, katılımcıların çoğunluğu Orta Derecede Şiddetli olarak sınıflandırıldı (43.5%) veya Şiddetli (26.1%), ve geri kalan katılımcılarda Orta veya Çok Az Belirgin OSB semptomları vardı (13.6% her biri). Şu tarihte: 6 aylar, Orta Derecede Şiddetli ve Şiddetli semptomları olan katılımcıların oranı azaldı (22.7% her biri), geri kalan katılımcılar Orta olarak sınıflandırıldı (31.8%), Hafif (13.6%), veya Zar zor belli (9.1%). Şekil 3B, CGI-I'in dağılımını göstermektedir. 6 Ve 12 aylar. Bu zaman noktalarının her birinde ölçülen iyileşme başlangıç ​​düzeyine göredir. Şu tarihte: 6 aylar, 9 katılımcılar (40.9%) herhangi bir değişiklik göstermedi, halbuki 2 (9.1%) Minimal Düzeyde İyileştirildi, 8 (36.4%) Çok Geliştirildi ve 3 (13.6%) Çok İyileştirildi (P < .001). CGI-I 12 aylar benzerdi (p = .001), rağmen 2 katılımcılar (13.6%) başlangıçtan Minimal Olarak Daha Kötü olarak derecelendirildi, oysa 6 aylık değerlendirmede bu kategoride hiçbir katılımcı yoktu. CGI-I 12 aylar sözsüz IQ ile ilişkilendirildi, ancak yaş veya infüze edilen hücre dozu değil (gösterilmiyor).

Figür 3
Şekil görüntüleyicide açPowerPoint
Küresel Gösterim Ölçeği (GCI). (A): Zaman içerisinde CGI-Şiddeti. (B): CGI-Başlangıca göre iyileşme şu tarihte değerlendirilmiştir: 6 Ve 12 aylar.

PDDBI—Otizm Bileşik T-Skoru, OSB semptomlarını değerlendiren, ebeveynlerin bildirdiği bir ölçümdür. PDDBI başlangıçta uygulandı, 3, 6, 9, Ve 12 aylar (Masa 2). Otizm Bileşik T-Skoru zamanla azaldı, OSB semptomlarında iyileşme olduğunu öne sürüyor. Değişimin büyük çoğunluğu başlangıç ​​seviyesinden başlangıç ​​noktasına kadar olan aralıkta meydana geldi. 3 aylar, tahmin edilen ortalama düşüş ile 7.52 puan (95% CI: −12,38, −2,67; p = .004). itibaren önemli bir değişiklik olmadı 3 ile 12 aylar (Anlam: 0.72, 95% CI: −1,14, 2.57; p = .43).

Masa 2. Davranışsal değerlendirmelerin özeti
Başlangıç ​​çizgisi 6 aylar 6 ile 12 aylar
Sonuç ölçüsü
HAYIR. ile ilgili

hastalar

değerlendirildi

Puanı değiştir

median (Menzil)

p değeri
Puanı değiştir

median (Menzil)

p değeria
VABS Sosyalleşme Standart Puanı 24 2.0 (−8, 30) .016 0 (−19, 9) .602
VABS İletişim Standardı Puanı 24 4.5 (−8, 20) .002 0.0 (−13, 13) .459
VABS Uyarlanabilir Davranış Bileşik Standart Puanı 24 3 (−3, 24) .007 0 (−12, 8) .687
VABS Motor Standart Puanı 24 0 (−10, 7) .788 0 (−14, 16) .991
VABS Günlük Yaşam Standart Puanı 24 1 (−9, 34) .457 0 (−16, 16) .999
EOWPVT Ham Skor 22 4 (−1, 24) .001 5.5 (−12, 16) .001
PDDBI Otizm Bileşik T-Scoreb 25 7.52 (−12,38, −2,67) .004 0.72 (−1,14, 2.57) .430
p değerleri PDD-BI için Wilcoxon işaretli sıralama testinden veya spline modelinden alınmıştır..
b PDD-BI başlangıçta toplandı, 3, Ve 6 aylar. Değişim puanları tahmin edilen ortalamadır (Ve 95% güven aralığı) düğümlü doğrusal bir spline modelinden 3 aylar.
Kısaltmalar: EOWPVT, Anlamlı Tek Kelimeli Resim Kelime Bilgisi Testi-4; ÖZGÜR, Vineland Adaptive Behavior Scales‐II; PDDBI, Yaygın Gelişimsel Bozukluk Davranış Envanteri.
EOWPVT, konuşulan bir kelimeyi bir resimle eşleştirme becerisinin klinisyen tarafından yönetilen bir değerlendirmesidir.. EOWPVT ham puanı iyileşti 57% Başlangıç ​​ve başlangıç ​​arasındaki hastaların 6 aylar ve içinde 68% 6-12 ay arası hastaların (Masa 2). EOWPVT ham puanındaki değişiklik sözel olmayan IQ ile ilişkilendirildi (temel çizgisi 6 aylar: rS = .59, 95% CI: 0.23, 0.80, p = .002; 6–12 ay: rS = .55, 95% CI: 0.15, 0.78; p = .009), ancak yaş veya infüze edilen hücre dozu değil (P > .05 her ikisi için).

Göz Bakışı İzleme, denek doğal bir bakış açısına bakarken katılımcıların göz hareketlerinin bir bilgisayar tarafından takip edildiği bilgisayarlı bir testtir., dinamik sosyal teşvik (nişan için teklif veren oyuncu) bir monitörde çeşitli sosyal olmayan uyaranlarla çevrili. Dikkat dört hedefe doğru ölçüldü (aktrisin gözleri, ağız, yüz, ve üst vücut) ve her hedef için ayrı GEE modelleri uygundu. Her model dahil 21 başlangıçta ölçülen katılımcılar, 6, Ve 12 aylar. Bu modeller gösterdi 20% zamanla oyuncunun gözlerine bakma ihtimalinin artması (VEYA = 1,20, 95% CI: 1.00, 1.43, p = .048). Diğer üç hedefe bakışta önemli bir değişiklik olmadı (Masa 3). Examination of the relation between eye‐tracking and the VABS‐II socialization standard score revealed that a 7‐point change in VABS‐II socialization standard score was associated with a 14% increase in odds of gazing at the actress (OR = 1.14, 95% CI: 1.07,1.21; P < .001).

Masa 3. Summary of eye tracking studies (n = 21)
Target Odds ratio (95% CI)a p value
Eyes 1.20 (1.00, 1.43) .048
Actress 1.02 (0.92, 1.12) .716
Mouth 0.93 (0.81, 1.06) .270
Face 1.02 (0.91, 1.14) .800
a Odds ratios are estimated using Generalized Estimating Equations (one model for each target) and reflect the average trend in the cohort between successive 6‐month follow‐up periods (temel çizgisi 6 aylar, Ve 6 ile 12 aylar).
Adjustment for Multiple Testing
Given the large number of behavioral tests in this study, FDR yöntemini birinci ve ikinci 6 aylık takip dönemlerine ayrı ayrı uygulayarak dokuz davranışsal sonuç ölçümü arasında yanlış pozitif sonuçların olasılığını araştırdık. (Masa 4). İlk dönemde anlamlı sonuçlar veren sonuç ölçümlerinin tümü 6 p değerlerinin FDR ayarlamasından sonra aylık takip istatistiksel olarak anlamlı kaldı. tarihinden itibaren dönem boyunca 6 ile 12 aylar, EOWPVT ve CGI-I, FDR prosedürünün uygulanmasından sonra istatistiksel olarak anlamlı kaldı.

Masa 4. Davranışsal sonuçlarda zaman içinde değişiklik yok boş hipotezinin testleri için ham ve düzeltilmiş p değerleri
Başlangıç ​​çizgisi 6 aylar 6 ile 12 aylar
Sonuç ölçüsü Ham p değeri FDR p değeri Ham p değeri FDR p değeri
EOWPVT Ham Skor .0001 .0009 .0011 .0059
CGI-I .0010 .0045 .0013 .0059
VABS İletişim Standardı Puanı .0020 .0060 .4590 .8262
PDDBI Otizm Bileşik T-Scorea .0040 .0090 .4300 .8262
VABS Uyarlanabilir Davranış Bileşik .0070 .0126 .6870 .8833
VABS Sosyalleşme Standart Puanı .0160 .0240 .6020 .8833
CGI-S .0220 .0283 .3750 .8262
VABS Günlük Yaşam Standardı puanı .4600 .5175 .9999 .9999
VABS Motor Fonksiyonu Standart Puanı .7880 .7880 .9907 .9999
a p values for the PDDBI are for baseline to 3 months and 3 ile 12 aylar.
Kısaltmalar: CGI‐I/S, Clinical Global Impression—Improvement/Severity; EOWPVT, Anlamlı Tek Kelimeli Resim Kelime Bilgisi Testi-4; FDR, False Discovery Rate; PDDBI, Yaygın Gelişimsel Bozukluk Davranış Envanteri; ÖZGÜR, Vineland Adaptive Behavior Scales‐II.
Tartışma
Bu aşamada açık etiketli bir çalışma yapıyorum, OSB'li küçük çocuklarda otolog göbek kordon kanının tek bir intravenöz infüzyonunun güvenliğini ve uygulanabilirliğini değerlendirdik. Ayrıca gelecekteki hücre terapisi denemelerinde hangisinin son nokta olarak kullanım için en uygun olacağını belirlemek amacıyla çeşitli davranışsal ve fonksiyonel sonuç ölçütlerindeki değişiklikleri de tanımladık.. AE'lerin değerlendirmeleri 12 İnfüzyondan aylar sonra kordon kanı infüzyonunun güvenli ve iyi tolere edildiği görüldü. İlgili tüm olayların beklendiği kabul edildi ve herhangi bir sonuç olmadan çözüldü. En yaygın ilgisiz AE'ler ajitasyondu, cilt değişiklikleri, ve tipik çocukluk çağı enfeksiyonları. Ajitasyon, özellikle, diğer edinilmiş nörolojik rahatsızlıkları olan çocuklarda otolog kordon kanı infüzyonları ile ilgili önceki çalışmalarımızda yaygın bir yan etki değildi, ve dolayısıyla otizmli çocuklara özgü olabilir. Bu çalışmada, katılımcılara kordon kanı infüzyonundan hemen önce MRI için sedasyon uygulandı. Artan ajitasyon vakası, OSB'li bir çocuk için sedasyondan uyanmanın ve serum ve nabız oksimetresinin yerinde olmasının zorluklarını yansıtabilir., ve bu nedenle altta yatan durumlarıyla ilgili olabilir.

Bu çalışmada çok çeşitli sonuç ölçümlerinde davranışta önemli iyileşmeler bulunmuştur.. Bunlar arasında VABS-II Sosyalizasyonu da dahil olmak üzere ebeveynler tarafından bildirilen önlemlerdeki gelişmeler yer alıyordu., İletişim, ve Uyarlanabilir Davranış Puanları ve PDDBI, CGI-S dahil klinisyen değerlendirmeleri, CGI-I, ve EOWPVT, ve objektif göz bakışı izleme ölçümleri. Gözlemlenen davranış değişikliklerinin çoğu ilk dönemde meydana geldi. 6 aylar arasında sürdürüldü ve 6 Ve 12 infüzyondan aylar sonra. Sağlam bir bulgu, çocukların sözel olmayan IQ'sunun sonuç ölçümlerinin çoğunluğundaki değişimle ilişkili olmasıydı., Daha yüksek sözel olmayan IQ, davranışlarda daha büyük iyileşmelerle ilişkilidir.

Dikkate değer, Bu çalışmaya katılanların çoğunluğu beyazdı, ABD'deki demografiyi yansıtıyor. kaynaklara sahip olması ve bebeğinin göbek kordonu kanını özel bir bankaya yatırmayı seçmesi muhtemeldir. Fakat, OSB tüm demografik kökenlerden çocuklarda görüldüğü için, Kordon kanı tedavisi etkiliyse, yalnızca otolog hücrelerin kullanılması durumunda erişim, özel bankacılık kaynaklarına sahip ailelerle sınırlı olacaktır.. Buna göre, bir sonraki çalışmamız mevcut en iyi donörü test edecek (otolog veya allojenik) Etkilenen tüm çocukların bu tedaviye erişimini genişletmek için zemin hazırlamak amacıyla plaseboya karşı, etkili olduğu tespit edilirse.

Bu sonuçlar OSB'de kordon kanından elde edilen tedavilerle gelecekte yapılacak çalışmalar için bazı umutlar sağlarken, Bu çalışmanın sınırlamalarına dikkat etmek önemlidir. Kontrolsüz açık etiketli bir çalışma olarak, gözlenen davranış değişikliklerinin tedaviden mi kaynaklandığını yoksa okul öncesi dönemdeki gelişimin doğal seyrini mi yansıttığını tespit etmek mümkün değildir.. İsveçli çocukların yaşları üzerine yakın zamanda yapılan boylamsal bir çalışma 1.5 ile 3 ASD'li yıllar ortalama bir iyileşme gösterdi 3.0 VABS İletişim ölçeğindeki puanlar ve 1.0 VABS Sosyalleşme ölçeğinde 2 yıllık bir süre boyunca puan 38, karşı 4.5 puan ve 2.0 puan, sırasıyla, Bu çalışmada kordon kanı ile tedavi edilen hastalarda 6 aylık bir süre boyunca. Fakat, Potansiyel kültürel farklılıklar ve değerlendirmelerin farklı zamanlaması bu iki grubun doğrudan karşılaştırılmasını zorlaştırmaktadır.. Ek olarak, Bu çalışmadaki örneklem büyüklüğünün küçük olması, karıştırıcı değişkenlerin katkılarının tam olarak değerlendirilmesini zorlaştırmaktadır.. Davranış değişiklikleri ile yaş arasında bir ilişki bulamadık, davranışsal müdahale hizmetlerinin miktarı veya aşılanan hücre dozu, sınırlı örneklem büyüklüğü ve sınırlı yaş ve doz aralıkları, bu tür ilişkilerin saptanma yeteneğini azaltabilir.

Yukarıda açıklanan her sonuç ölçümü değişime duyarlılık gösterdi, daha büyük denemelerde potansiyel yararlılığını gösteren. Üstelik, Bu önlemlere uyulmamasından kaynaklanan yıpranma minimum düzeydeydi, bu önlemlerin bu yaş aralığındaki OSB'li çocuklarda uygulanabilir olduğunu öne sürüyoruz. Bu çalışmanın sonuçlarını bir rehber olarak kullanmak, ebeveyn beklentisi etkilerini azaltmak amacıyla eğitimli klinisyenler tarafından uygulanan bir sonraki çalışmamız için birincil sonuç ölçüsü olarak VABS Sosyalizasyon Standart Puanını seçtik. Bu puan otizmle ilgili temel sosyal davranışların doğrulanmış bir ölçüsünü sağlar, Mevcut çalışmada 6 aylık bir süre boyunca değişime duyarlılık gösterdi, ve daha büyük bir klinik denemede uygulanabilir. Avrupa İlaç Ajansı'nın otizm klinik araştırmalarının tasarımına ilişkin güncel taslak kılavuzuna uygun olarak 39, tek bir tedavinin tüm otizm belirtilerini iyileştirmeyebileceğinin ve bu nedenle genel işlevsel iyileşmenin otizmde etkinlik değerlendirmesinin önemli bir bileşeni olduğunun farkındayız. Öyleyse, Ayrıca bir sonraki çalışmamıza klinisyen tarafından derecelendirilen CGI'yi ve ikincil sonlanım noktaları olarak ek önlemleri de dahil ettik., bir aşama II, OSB'nin temel semptomlarını iyileştirmede göbek kordon kanı infüzyonunun etkinliğini resmi olarak değerlendirmek için tasarlanmış çift kör, randomize klinik çalışma.

_______________________________

Reklamcılık:

Avrupa'da Kök Hücre Tedavisi

_______________________________

Çözüm
Açık etikette gösteri yaptık, OSB'li küçük çocuklarda otolog göbek kordon kanının intravenöz infüzyonunun güvenli ve uygulanabilir olduğunu gösteren faz I denemesi. İlk aşamada gözlemlenen davranıştaki önemli gelişmeleri tanımlıyoruz. 6 infüzyondan aylar sonra ve sürekli olarak 12 aylar. Daha yüksek temel sözel olmayan IQ, daha yüksek derecede iyileşme ile ilişkilendirildi. Uygulanabilir sonuç ölçütlerini belirledik, değişime duyarlı, ve gelişimsel olarak uygun, ve bu nedenle OSB'li küçük çocukların tedavisinde kordon kanı tedavisinin etkinliğini test etmek için gelecekteki klinik çalışmalarda kullanılmaya uygundur..

rootcellsjournals.onlinelibrary.wiley.com