ذاتي الحقن دم الحبل السري هي آمنة ومجدية في الأطفال الصغار مع اضطراب طيف التوحد: نتائج حيدة مركز المرحلة الأولى المفتوح تسمية محاكمة

stem cell

 

على الرغم من التقدم في التشخيص المبكر والعلاج السلوكي, علاجات أكثر فعالية للأطفال الذين يعانون من اضطراب طيف التوحد (ASD) مطلوبين. افترضنا أن الحبل السري علاجات الخلايا المشتقة من الدم قد يكون المحتملة في تخفيف أعراض ASD عن طريق تحوير عمليات التهابات في الدماغ. وفقا لذلك, أجرينا المرحلة الأولى, محاكمة المفتوح التسمية لتقييم سلامة وجدوى التسريب في الوريد واحد من ذاتي دم الحبل السري, وكذلك الحساسية للتغيير في العديد من أدوات التقييم ASD, لتحديد نقاط النهاية مناسبة للمحاكمات في المستقبل. خمسة وعشرين طفلا, منتصف العمر 4.6 سنوات (مجموعة 2،26-5،97), مع تأكيد التشخيص من ASD ووحدة المؤهلة راهن ذاتي دم الحبل السري, كانوا مسجلين. تم تقييم الأطفال مع مجموعة من الاختبارات السلوكية والوظيفية على الفور قبل الحبل ضخ الدم (خط الأساس) و 6 و 12 بعد شهور عديدة.

أشار تقييم الأحداث السلبية في فترة 12 شهرا أن المعالجة كانت آمنة وجيد التحمل. لوحظ تحسن كبير في سلوك الأطفال على التدابير الوالدين وتقرير مهارات التواصل الاجتماعي وأعراض مرض التوحد, تصنيفات الأطباء السريريين من مجمل شدة التوحد أعراض ودرجة التحسن, تدابير موحدة من المفردات التعبيرية, ومقاييس موضوعية لتتبع العين من انتباه الأطفال للمؤثرات الاجتماعية, مشيرا إلى أن هذه التدابير قد تكون النهاية مفيدة في الدراسات المستقبلية.

stem cell ukraineوقد لوحظت التحسينات السلوكية خلال أول 6 أشهر بعد الحقن، وكانت أكبر في الأطفال الذين يعانون من درجات الذكاء غير اللفظي الأساسية العليا. وستكون هذه البيانات كأساس للدراسات المستقبلية لتحديد فعالية السري ضخ دم الحبل السري عند الأطفال الذين يعانون من التوحد. الخلايا الجذعية بالحركة الطب 2017;6:1332-1339

____________________________

الإعلانات:

الخلايا الجذعية العلاج في أوكرانيا

____________________________

بيان أهمية
توضح هذه المرحلة أدرس أنه آمن وعمليا لأداء ذاتي السري ضخ دم الحبل السري عند الأطفال الصغار الذين يعانون من اضطراب طيف التوحد، ويحدد عدة تدابير نتائج واعدة لاستخدامها في التجارب المستقبلية.

المقدمة
اضطراب طيف التوحد (ASD) هو اضطراب النمو العصبي يتميز ضعف في التواصل الاجتماعي ووجود السلوكيات المتكررة ومجموعة محدودة من الأنشطة, مع بداية مبكرة في الحياة. ويقدر ASD أن تؤثر على ما يقرب من 1 في 68 الأطفال فى الولايات المتحدة. 1. غالبية الأفراد مع ASD ليست قادرة على العيش بشكل مستقل وتتطلب الدعم مدى الحياة أو الإقامة. وفقا لذلك, وتقدر تكلفة مدى الحياة دعم الفرد مع ASD أن تكون $1.4 مليون. وكان الثمن هو $2.4 مليون لأولئك الذين لديهم أيضا إعاقة ذهنية 2.

وتشمل أساليب علاجية لASD الدواء, العلاج السلوكي, العلاجات المهنية والكلام, والدعم التربوي والمهني المتخصص. ويرتبط التدخل السلوكي المكثف المبكر مع تحسين النتائج بشكل كبير 3, ولكن حتى مع هذا التدخل, تبقى العديد من الأفراد مع ASD ضعف بشكل ملحوظ. كل من العلاجات الطبية المتوفرة حاليا, مثل الأدوية النفسية, وتهدف إلى تحسين الأعراض المرضية المصاحبة, مثل التهيج, ولكن لا تعالج أعراض التوحد الأساسية. في ضوء ذلك, هناك حاجة غير الملباة كبيرة لعلاجات أكثر فعالية استهداف الأعراض الأساسية من ASD.

كلا تساهم العوامل الوراثية والبيئية لمسببات ASD 4-6. على الرغم من أن الفيزيولوجيا المرضية الدقيق غير معروف, وشملت الملاحظات سير متشابك الشاذ في مناطق الدماغ 7, 8, الاضطرابات التي تصيب المادة البيضاء 9, وneuroinflammation 10. قد تكون التسبب في أمراض المناعة في أدمغة المرضى الذين يعانون من ASD المقرر أن overexpression من الشبكات الجينات المرتبطة بالمناعة 11, وجود الأجسام المضادة الأم إلى الجنين أنسجة المخ 12, مستويات شاذة من السيتوكينات الموالية للالتهابات (IL-6, TNF-α) في السائل الشوكي الدماغي 13, وتفعيل دبقية المفرط يؤدي إلى مسارات الربط العصبية الشاذة 14, 15. كما, النهج العلاجية التي تؤثر على تعديل أو تنظيم الاتصال العصبي المناعي أهدافا منطقية لعلاجات جديدة لهذه الفئة من السكان. وقد أظهرت نماذج ما قبل السريرية أن دم الحبل السري يحتوي على خلايا المستجيب أن, من خلال إشارات نظير الصماوي, تغيير الربط الدماغ وأيضا قمع التهاب 16, 17. وقد ثبت دفعات من خلايا دم الحبل السري ذاتي لتكون آمنة في المرضى الذين يعانون من الشلل الدماغي وإصابات الدماغ المكتسبة أخرى 18-20. افترضنا أن دفعات من خلايا دم الحبل السري ذاتي يمكن أن تلعب دورا هاما في علاج ASD وأجرى مركز واحد, فتح المسمى, سلامة للمرحلة الأولى ومحاكمة جدوى في عدد المشتركين لدى الأطفال الصغار. وركزت الدراسة على (ا) سلامة من التسريب في الوريد واحد من ذاتي دم الحبل السري و (ب) حساسية لتغيير وجدوى إدارة عدة أدوات التقييم المختلفة عند الأطفال الصغار مع ASD.

stem cell therapy ukraine

المواد والأساليب
تصميم الدراسة ونظرة عامة
وكانت هذه الدراسة المرحلة الأولى, واحدة في وسط, محاكمة المفتوح التسمية من التسريب في الوريد واحد من ذاتي دم الحبل السري في 25 الأطفال الذين يعانون من التوحد. تم تسجيل جميع الأطفال في البداية على بروتوكول الفحص للحصول على السجلات الطبية والمعلومات حول وحدتهم دم الحبل السري في المصارف. أكملت مقدمي الرعاية جميع المشاركين في مقابلة الفرز prestudy عن طريق الهاتف، وقدمت السجلات وأشرطة الفيديو الطبية للمراجعة من قبل فريق الدراسة لتحديد الأهلية للمحاكمة. وكان الأطفال مع تأكيد التشخيص من ASD ووحدة المؤهلة راهن ذاتي دم الحبل السري مؤهلة للمشاركة. تم الحصول على الموافقة المسبقة الخطية لكل من الفحص ومراحل العلاج للمحاكمة. وتمت الموافقة على محاكمة من قبل مجلس مستشفى ديوك المراجعة المؤسسية وأجريت تحت IND #15949.

سافر المشاركين والقائمين على رعايتهم لجامعة ديوك ثلاث مرات كجزء من مشاركتها في الدراسة. في زيارة خط الأساس, كانوا تقييمها وحصل على الوريد الحبل ذاتي ضخ الدم واحد. في 6 و 12 أشهر بعد التسريب, عاد المشاركون لتقييم السريرية المتابعة. جمعت المقابلات الرعاية إضافية والاستبيانات في 3 و 9 أشهر بعد التسريب.

المشاركين
المشاركون بين 2 و 5 سنة من العمر الذي التقى معايير التشخيص السريري من ASD استنادا إلى الدليل التشخيصي والإحصائي للاضطرابات العقلية, الطبعه الخامسة (DSM-5) 21 كانت مؤهلة لإدراجها الدراسة. تأسست تشخيص DSM-5 من ASD من قبل الأطباء الخبراء وأبلغ من قبل التشخيص جدول مراقبة للتوحد (TEENS), الطبعة الثانية 22 ومقابلة تشخيص التوحد, مراجعة (ADI-R) 23. وتضمنت معايير الاشتمال إضافية (ا) وحاصل الذكاء غير اللفظي (معدل الذكاء) من ≥ 35 على المخابرات ستانفورد بينيه الميزان للطفولة المبكرة, الطبعه الخامسة 24 أو مولن الموازين التعلم المبكر 25, (ب) توفر وحدة دم الحبل السري ذاتي المؤهلة, (ج) ومن بين المشاركين مستقر على أدويتهم الحالية على الأقل 2 أشهر قبل التسريب, (د) القدرة على السفر لجامعة ديوك ثلاث مرات (خط الأساس و 6 و 12 أشهر بعد خط الأساس), و (البريد) كان والدا يتحدث الانجليزية. وتضمنت معايير الاستبعاد (ا) تاريخ العلاج بالخلايا مسبق, (ب) استخدام الغلوبولين المناعي الوريدي أو غيرها من الأدوية المضادة للالتهابات (باستثناء المسكنات), (ج) المعروف الوراثية (مثلا, الهش X) أو الاعتلال المشترك طبية هامة أخرى, (د) dysmorphology البدني الواضح موح من متلازمة وراثية, (البريد) اضطراب الاستيلاء غير المنضبط, (F) ضعف كبير في وظيفة الكلى أو الكبد, و (ز) تشوهات هامة سريريا في تعداد الدم الكامل.

وحدات دم الحبل السري
وكان جميع المشاركين إلى وجود وحدة دم الحبل السري ذاتي المتاحة راهن في الأسرة أو الحبل العام بنك الدم. أثناء الفحص, تم استعراض تقارير دم الحبل السري المشاركين المحتملين للتأكد من أنها تفي بمعايير قبل الحفظ بالتبريد التالية: (ا) إجمالي عدد خلايا الأنوية (قروب)≥ 1 × 107 / كغ, (ب) الثقافات العقم التي كانت متشكلة والسلبية, (ج) علامات المعدية الأمهات السلبية المرض اختبارها على الجهة المانحة أو الحبل المنتج دم الأم (بما في ذلك الحد الأدنى من التهاب الكبد B, التهاب الكبد ج, فيروس نقص المناعة البشرية [فيروس نقص المناعة البشرية], T-المنمي للمفاويات البشري فيروس [HTLV], والزهري), و (د) عينة الاختبار المتاحة لإجراء اختبارات إضافية. إذا كان من المحتمل أن يكون مؤهلا المشارك وحدة دم الحبل السري الخاصة, تم شحنها عينة من وحدة دم الحبل السري لدوق لاختبار قوة 26. تم إجراء منخفضة الدقة اختبار HLA على كل من المشاركين وعينة من وحدة دم الحبل السري للتأكيد الهوية. إذا كانت الجدوى CD45 على عينة الاختبار >40% وأكد HLA-الهوية, تم شحنها وحدة دم الحبل السري cryopreserved في الشاحن جافة لدوق الجذعية مختبر زرع الخلايا, حيث تم تخزينها تحت النيتروجين السائل حتى اليوم التسريب.

الإجراءات
ذاتي السري تسريب دم الحبل السري

في اليوم التسريب, وإذابة دم الحبل السري وغسلها في ديكستران 40 + 5٪ الزلال (OF) وضعت في 1.25 مل / كغ DA للإدارة 27. تم اختبار وحدات دم الحبل السري إذابة للتعداد قروب, CD34 + الخلايا قابلة للحياة, مستعمرة (CFUs), بقاء الخلية عن طريق الأزرق التريبان, والثقافات العقم. تم إجراء السري ضخ دم الحبل السري ذاتي بعد تخدير الدماغ بالرنين المغناطيسي مسح التصوير (MRI). وريدي (IV) تم الحصول على وصول طبيب التخدير طب الأطفال. عندما كان MRI الكامل, تم قبول الأطفال إلى مستشفى المركز الصحي يوم دوق الأطفال, مركز العلاج في العيادات الخارجية, للتسريب من. بعد تخدير مع بينادريل (0.5 مغ / كغ IV), سولو-ميدرول (0.5 مغ / كغ IV), و, إذا كان الطفل مستيقظا وقادرا على اتخاذ الأدوية عن طريق الفم, تايلينول (10 مغ / كغ PO), تلقى المشاركون إما جزء من أو وحدتهم دم الحبل السري بأكمله, تعديل لتسليم 1-5 × 107 خلايا لكل كيلوغرام, عبر ضخ IV الطرفية على 2 إلى 30 الدقائق. كانت تدار السوائل الوريدية في 1.5 صيانة مرات ل 30 دقيقة ل 2 بعد ساعات من ضخ دم الحبل السري. تم رصد العلامات الحيوية وقياس التأكسج باستمرار خلال ضخ وحتى استيقظ الطفل من التخدير.

معايير التقييم السلامة
وقد لوحظت المشاركين خلال ضخ ورصد لردود الفعل التسريب. أحداث سلبية إضافية (AE) تم تحديدها من خلال مقابلات هاتفية مع المشاركين الوالد / ولي الأمر في 7-10 أيام, 3 الشهور, و 9 بعد شهور ضخ, وشخصيا في الأساس, 6- ومرة ​​العيادة لمدة 12 شهرا. للتحليل, تم تعيين حيث حرفيا AE على مصطلحات القياسية التي تحددها معايير المصطلحات الشائعة للأحداث السلبية (CTCAE) الإصدار 4.0 وتتلخص وفقا لشدة والعلاقة مع تدخل والحكم عليها من قبل المحقق.

تقييم السريرية
واستخدمت تقييمات متعددة لتحديد كل إمكانية إدارة وفائدة بمثابة نقطة النهاية للمرحلة المقبلة II و III التجارب السريرية. وشملت هذه فينلاند التكيف السلوك الميزان-II (VABS-II), السريرية مقياس الانطباع العالمية (CGI), تفشي التنموي اضطراب السلوك الجرد (PDDBI), معبرة واحد وورد صورة المفردات تجارب 4 (EOWPVT-4), تقييم السلوك لمهارات الأطفال الاجتماعية-الفروع الجانبية, الشاذة السلوك المرجعية, الخبرات الحسية استبيان, تكرار السلوك مقياس, مقاييس الذكاء (الميزان مولن من التعليم المبكر أو ستانفورد بينيه), تحليل البيئة اللغوية, تقييم مرحلة ما قبل المدرسة السن للطب النفسي, الشاذة السلوك المرجعية, ATN الأعراض GI الجرد, ومؤشر الإجهاد الأبوة والأمومة. بالإضافة الى, تم جمع ثلاثة مؤشرات حيوية موضوعية: تتبع النظرة العين من المحفزات الاجتماعية (EGT), EEG, والتصوير بالرنين المغناطيسي الدماغ. وسيتم إبلاغ EEG والتصوير بالرنين المغناطيسي الدماغ النتائج بشكل منفصل. نتائج التدابير التي تم اختيارها مسبقا بمثابة نقطة النهاية السلوكية الابتدائية (نتيجة VABS-II التنشئة الاجتماعية الفرع الجانبي القياسي) والنهاية السلوكية الثانوية رئيسية مثل (CGI, PDDBI, EOWPVT) ومن العلامات البيولوجية EGT تم تضمينها في هذا التقرير.

في سلوك التكيفي فينلاند الميزان-II (VABS-II) 28 هو استبيان الرعاية التي تستخدم لتقييم سلوك الأطفال على التكيف عبر مجموعة واسعة من المجالات. وVABS-II هو مقياس موحد-جيدا مع موثوقية قوية وصحة 29-32 والتي ينتج على درجة مركبة الشاملة, فضلا عن عشرات الفروع الجانبية القياسية في المجالات التالية: التنشئة الاجتماعية, الاتصالات, مهارات الحياة اليومية, والمهارات الحركية. تم جمع VABS-II من الرعاية لكل مشارك الأولية على خط الأساس و6- ومرة ​​لمدة 12 شهرا. تم استخدام نتيجة التنشئة الاجتماعية الفرع الجانبي لقياس التحسن في أعراض ASD الأساسية للسلوك الاجتماعي.

الانطباع العالمية السريرية (CGI) هو مقياس التصنيف المستخدمة عادة الذي يقيس شدة الأعراض والاستجابة للعلاج أو تغيير في السلوك بين النقاط الزمنية. تم استخدام نسختين من CGI: CGI-شدة (CGI-S) وCGI-تحسين (CGI-I). وCGI-S هو مقياس 7 نقاط مما يدل على شدة الأعراض كل مشارك من ASD في وقت التقييم, نسبة إلى تجربة التصنيفات الخبير الماضية مع المشاركين الذين لديهم نفس التشخيص. واستنادا إلى الخبرة السريرية العمر والمقيم الخبير وجميع المعلومات المتاحة, تم تقييم كل مشارك كما 1: غير موجود (لا ASD), 2: أعراض ASD واضح بالكاد, 3: أعراض خفيفة ASD, 4: أعراض معتدلة ASD, 5: أعراض متوسطة الشدة ASD, 6: أعراض حادة ASD, أو 7: أعراض حادة جدا ASD. تم تعيين كل مشارك على تصنيف CGI-S في الأساس، و 6 و 12 مرة في الشهر. وCGI-I هو مقياس 7 نقاط مما يدل على درجة التحسن أو تفاقم الأعراض ASD النسبية مع خط الأساس. وبناء على جميع المعلومات المتاحة, تم تقييم كل مشارك كما 1: تحسنت كثيرا جدا, 2: تحسنت كثيرا, 3: تحسين الحد الأدنى, 4: لا تغيير, 5: أسوأ الحد الأدنى, 6: أسوأ بكثير, أو 7: أسوأ بكثير جدا. تم تعيين كل مشارك على تصنيف CGI-I في مرة 6- و12 شهرا, وكل المشار درجة التحسن أو تفاقم نسبة إلى خط الأساس. وقدمت جميع CGI-S وCGI-I التصنيفات من قبل الأطباء ذوي الخبرة العالية من ذوي الخبرة في ASD.

وPDDBI 33 هو استبيان الرعاية التي تم تصميمها لقياس السلوك الاجتماعي, سير التكيف, وعمل غير القادرة على التأقلم في المناطق المتضررة عادة بواسطة ASD. كانت موحدة في PDDBI مع عينة من مقدمي الرعاية والمعلمين من الأطفال الذين يعانون من التوحد من مجموعة من العنصرية, عرقي, والخلفيات الاجتماعية والاقتصادية 34. تم جمع PDDBI من الرعاية الأولية كل مشارك في الأساس, 6مرة و12 شهرا -, فضلا عن بعد في 3 و 9 أشهر بعد خط الأساس.

وEOWPVT-4 35 هو تقييم تديرها الطبيب الذي يقيس قدرة الفرد لمطابقة الكلمة المنطوقة مع صورة لكائن, عمل, أو مفهوم. كانت تدار من EOWPVT-4 لكل طفل في الأساس، ومرة ​​6- و12 شهرا.

كانت تدار مهمة تهدف إلى قياس الانتباه البصري لالاجتماعية مقابل محفزات الغير اجتماعية عبر EGT. EGT هي التكنولوجيا التي تمكن الكمي لأنماط أنظار أفراد من الرضاعة وحتى سن البلوغ. الأجهزة EGT 36 يستخدم الأشعة تحت الحمراء الثنائيات الباعثة للضوء وكاميرات الأشعة تحت الحمراء لقياس انعكاسات القرنية, والتي تستخدم لحساب الاتجاه نظرات العين. خلال مهمة EGT, شاهد المشاركون الفيديو 4 دقائق من المحفزات الاجتماعية الحيوية, التي تشمل حلقات ممثلة تقديم عروض لاهتمام مشترك 37. باستخدام هذه المحفزات, وقد وجدت دراسات سابقة أن الأطفال الصغار مع ASD عرض انخفض الاهتمام على حد سواء لكامل المشهد ولوجه الممثلة خلال عروض لاهتمام مشترك. انخفضت الانتباه إلى المشهد بأكمله ارتبط أيضا مع شدة التوحد أعراض 37. وقدم مهمة EGT لكل طفل في الأساس, 6مرة و12 شهرا -.

معلومات حول عدد الساعات التي أطفال شاركوا في السلوكية, لغة الكلام, مهني, والعلاجات السلوكية الأخرى والخدمات التعليمية الواردة تم تقييم الطفل كل ثلاثة أشهر من خط الأساس ل 12 أشهر بعد خط الأساس عن طريق منظمة مقابلة تدخل التاريخ مع الوالد.

أساليب إحصائية
اعتمد تحليل أساسي على المنهج الوصفي, بدءا من ملخص من الخصائص الأساسية للجماعة. وكانت المؤامرات مربع مستعدة لتوضيح توزيع مقاييس النتائج المستمرة مع مرور الوقت. وقد تآمر وتيرة مقاييس النتائج ترتيبي في كل نقطة زمنية باستخدام شريط الرسوم البيانية. تم تقييم دلالة إحصائية التغيير على النتائج المستمرة وترتيبي باستخدام قعت اختبار Wilcoxon رتبة باستثناء PDDBI, الذي كان على غرار باستخدام شريحة الخطي الأثر الثابت مع عقدة في 3 الشهور. وقد تم اختيار هذا النموذج على نماذج طولية أخرى الثابتة والعشوائية آثار استخدام معيار أكايكي للمعلومة. تم تحليل EGT باستخدام المعمم تقدير معادلات (GEE) مع وصلة اللوغاريتمي, هيكل خطأ الحدين, وصرف أو غير منظم علاقة العمل. جمعية عمر الأساسي, IQ غير اللفظي, وكان استطلاع غرست جرعة زنزانة مع التغيير مع مرور الوقت في كل تحليل باستخدام سبيرمان الارتباط (التمرير). لم يكن هناك ما يكفي من المسجلين الإناث لاستكشاف أنماط من التغيير عن طريق الجنس. أخيرا, قمنا بتقييم إمكانية للحصول على نتائج إيجابية كاذبة من خلال تطبيق Benjamini-هوشبرج الكاذبة اكتشاف السعر (فرانكلين روزفلت) الإجراء إلى نتائج لاحظ لخط الأساس إلى 6 أشهر وفترات المتابعة 6 إلى 12 شهرا.

النتائج
المشاركين
خمسة وعشرون مشاركا (21 الذكور, 4 الإناث), غالبية الأبيض (ن = 22, 1 آسيا, 2 عرق مختلط), التحق مع متوسط ​​عمر 4.62 سنوات (مجموعة 2،26-5،97) وIQ غير اللفظي متوسط 65 (مجموعة 22-123). وكانت النتيجة ADOS مقارنة متوسط ​​المشاركين في بداية الدراسة 8.0 (مجموعة 6-10), و 72% لديهم أعراض متوسطة الشدة أو شديدة ASD (الطاولة 1). الانتهاء من جميع المشاركين تقييمات أساسية و 6 أشهر. ثلاثة مشاركين لم يكمل تقييم لمدة 12 شهرا.

الطاولة 1. الخصائص الأساسية للمرضى وحدات دم الحبل السري ذاتي (ن = 25)
خصائص المريض
جنس, لا. (%)
إناثا 4 (16.0%)
الذكر 21 (84.0%)
عمر, سنوات, الوسيط (نطاق) 4.62 (2.26-5.97)
سباق, لا. (%)
أبيض 22 (88%)
آخر 3 (12%)
الأصل العرقي, لا. (%)
أصل اسباني 2 (8%)
لا ابيض 23 (92%)
ADOS خطورة نتيجة, الوسيط (نطاق) 8 (6-10)
حاصل الذكاء غير اللفظي, الوسيط (نطاق) 65 (22-123)
CGI-S, لا. (%)
واضح بالكاد 4 (16.0%)
أعراض معتدلة ASD 3 (12.0%)
ASD متوسط ​​الشدة 10 (40.0%)
أعراض شديدة ASD 8 (32.0%)
خصائص دم الحبل السري, الوسيط (نطاق)
مجموع الخلايا غرست, × 108 4.42 (1.53-12.28)
جرعة خلية غرست, × 106 / كغ 25.80 (9.97-80.80)
CD34 + قابلة للحياة جرعة غرست, × 105 / كغ 0.3 (0.1-4.2)
جرعة CFU غرست, /كلغ 1,225.50 (85.50-4،620.00)
الاختصارات: TEENS, تشخيص التوحد جدول المراقبة; ASD, اضطراب طيف التوحد; كفو, مستعمرة; CGI-S, السريرية العالمية الانطباع-شدة; قروب, إجمالي عدد خلايا الأنوية.
صبغ الدم الحبل السري
تم انتشال وحدات دم الحبل السري ذاتي من اثنين الامريكى. بنوك دم الحبل السري الأسرة والبنوك العامة واحدة (ن = 1). تم تخزينها في أكياس كل مقصورة مزدوجة. لتحقيق الجرعة الخلية المستهدفة من 1-5 × 107 قروب / كغ, تم استخدام وحدة دم الحبل السري كاملة في ستة مشاركين. في 19 المشاركين, ال 80% وقد تحسنت حجرة وحدة دم الحبل السري واستخدامها للتسريب والمتبقي 20% واستمر جزء في ولاية cryopreserved وتخزينها, بإذن الوالدين, للاستخدام المحتمل في المستقبل. الانتهاء من جميع مرضى النخاع ضخ الدم. وتظهر خصائص الحبل منتجات الدم إذابة تدار على المريض في الجدول 1. وكانت وسيطة قروب وخلية CD34 قابلة للحياة جرعات غرست 2.6 × 107 / كغ (مجموعة 1-8 × 107) و 0.3 × 105 / كغ (تتراوح 0،1-4،2 × 105), على التوالي. وكانت CFUs متوسط ​​غرست 1225،5 / كغ (مجموعة 85،5-4٬620). على الرغم من أن المعايير الجرعات المستخدمة في هذه الدراسة تتفق مع الدراسات السابقة لدينا استخدام وحدات دم الحبل السري في المصارف الخاصة, هذه قروب, CD34, والقيم CFU أقل من خبرة سابقة لدينا 18. وعلى الرغم من الثقافات العقم قبل الحفظ بالتبريد السلبية ذكرت من قبل البنك, نمت وحدة واحدة المكورات العنقودية السلبية المخثرة من عينة بعد ذوبان الجليد في جامعة ديوك.

سلامة
وكانت نقطة النهاية الرئيسية لهذا أنا محاكمة علنية مرحلة تسمية السلامة (تين. 1). كما ذكرت سابقا في دراستنا سلامة مسبقة من ذاتي الحبل ضخ الدم في الأطفال الذين يعانون من اضطرابات عصبية 18, كان جيد التحمل حبل ذاتي ضخ الدم. لم تكن هناك كيانات خطيرة ورد في أي مشارك. ما مجموعه 92 ولم يبلغ عن وكيانات في 23 المشاركين (تين. 1) بمتوسط ​​ثلاثة أحداث لكل مشارك (نطاق: 1-15). تم تصنيف كل الأحداث بأنها خفيفة (71 أحداث) أو متوسطة (21 أحداث). اثني عشر الأحداث (13%) واعتبرت ذات الصلة إلى ضخ, مع كونها الحساسية الأكثر شيوعا, يتجلى urticartia وأو / السعال يحدث في يوم من التسريب (5 أحداث في 4 المشاركين; كل الخفيف; 2 تتطلب جرعة إضافية من IV بينادريل). وكانت كيانات لا علاقة لها الأكثر شيوعا التحريض, التغيرات الجلدية, والتهابات الطفولة النموذجية, ذكرت بين 2 أيام و 1 سنة بعد التسريب. لم تكن هناك إصابات متعلقة ضخ أو التهابات مجرى الدم أو خطيرة لوحظ في أي مريض.

الشكل 1
مفتوحة في الشكل viewerPowerPoint
تواتر الظواهر السلبية. يتم سرد عدد من المرضى الإبلاغ حدث بين قوسين.

 

____________________________

الإعلانات:

الخلايا الجذعية العلاج في أوكرانيا

____________________________

اختبار السلوكي
اختبرنا أيضا إمكانية إدارة ووصف نتائج العديد من التدابير التي تستخدم عادة لتقييم النتائج السلوكية في الأطفال الذين يعانون من التوحد. تصنيف الوالدين ومتعددة وجرى تقييم تدابير تصنيف الطبيب. النتائج السلوكية المترابطة مع IQ الأساسي, ولكن ليس العمر أو جرعة خلية. كما لم ترتبط التغييرات في السلوك مع عدد ساعات التدخلات السلوكية, علاج النطق واللغة, العلاج الوظيفي أو التعليمية ساعات الطفل تلقى خلال فترة الدراسة. التدابير اختار, على النهاية السلوكية الابتدائية والأساسية (VABS-II, CGI-S, GCI-I, PDDBI, EOWPBT) وقياس العلامات البيولوجية EGT, أظهرت جميع التحسينات وهو موضح أدناه.

وVABS-II هو مقياس الوالدين والتقرير أن يقيم التنشئة الاجتماعية, الاتصالات, والسلوكيات التكيفية. الشكل 2 ويبين توزيع درجات قياسية في جميع المرضى (لوحة A) وعلى مستويات مختلفة حسب IQ (لوحة B) للمجال VABS-II التنشئة الاجتماعية في 24 المشاركين الذين أتموا التقييمات في جميع نقاط بعد ثلاثة. ولوحظ وجود زيادة ذات دلالة إحصائية في الدرجة المعيارية من خط الأساس ل 6 الشهور. وكان هذا التغيير مستقر من 6 إلى 12 الشهور. ارتبط إيجابيا مع تغيير IQ غير اللفظي في التنشئة الاجتماعية (روبية = 0.57, 95% CI: 0.20-0.79, ع =.004) والسلوك التكيفي (روبية = 0.42, 95% CI: 0.01-0.70, ع =.04) المجالات, ولكن ليس في مجال الاتصالات (روبية = 0.22, 95% CI: -0.21 ل 0.57, ع = 0.31).

الشكل 2
مفتوحة في الشكل viewerPowerPoint
فينلاند التكيف السلوك الميزان-II (VABS-II) نتيجة التنشئة الاجتماعية الموحدة. (ا): توزيع VABS-II التنشئة الاجتماعية قياسي يسجل في جميع المشاركين على مر الزمن. (ب): توزيع VABS-II التنشئة الاجتماعية يسجل مستويات مختلفة حسب حاصل الذكاء غير اللفظي.

وCGI-S و-I وتدابير تصنيف الطبيب تستخدم لتقييم شدة والتغير في شدة الأعراض الأساسية من ASD على مر الزمن. الشكل 3 ويبين توزيع CGI-S (لوحة A) وCGI-I (لوحة B) في 22 المشاركين الذين كانوا للتقييم بشكل كامل في جميع نقاط الوقت. في CGI-S, الحد الأدنى, صنفت غالبية المشاركين في متوسط ​​الشدة (43.5%) أو شديدة (26.1%), وكان المشاركون المتبقية أعراض ASD معتدلة أو وتتضح بالكاد (13.6% كل). في 6 الشهور, انخفضت نسبة المشاركين يعانون من أعراض متوسطة الشدة والشديد (22.7% كل), مع تصنيف المشاركين المتبقية بالمتوسطة (31.8%), معتدل (13.6%), أو واضح بالكاد (9.1%). ويبين الشكل 3B توزيع CGI-I في 6 و 12 الشهور. تحسين قياس في كل من هذه النقاط الزمنية نسبة إلى خط الأساس. في 6 الشهور, 9 المشاركين (40.9%) لم تعرض أي تغيير, بينما 2 (9.1%) تم تحسين الحد الأدنى, 8 (36.4%) وقد تحسنت كثيرا و 3 (13.6%) وقد تحسنت كثيرا جدا (ص<.001). وCGI-I في 12 وكانت أشهر مماثلة (ع =.001), برغم من 2 المشاركين (13.6%) وتصنف على أنها الحد الأدنى والأسوأ من خط الأساس, في حين لم يكن هناك أي مشاركين في هذه الفئة في تقييم لمدة 6 أشهر. وCGI-I في 12 وارتبط أشهر مع IQ غير اللفظي, ولكن ليس العمر أو جرعة خلية غرست (غير ظاهر).

الشكل 3
مفتوحة في الشكل viewerPowerPoint
مقياس الانطباع العالمي (GCI). (ا): CGI-خطورة مع مرور الوقت. (ب): CGI-تحسين على خط الأساس وفقا لتقييم في 6 و 12 الشهور.

وPDDBI-التوحد مركب T-النتيجة هي أحد الوالدين ذكرت مقياس تقييم أعراض ASD. كانت تدار من PDDBI في الأساس, 3, 6, 9, و 12 الشهور (الطاولة 2). انخفضت التوحد مركب T-النتيجة مع مرور الوقت, مما يشير إلى حدوث تحسن في الأعراض ASD. وقعت غالبية التغيير في الفترة من خط الأساس ل 3 الشهور, مع انخفاض متوسط ​​المتوقعة لل 7.52 نقاط (95% CI: -12.38, -2.67; ع =.004). لم يكن هناك تغير كبير من 3 إلى 12 الشهور (تعني: 0.72, 95% CI: -1.14, 2.57; ع = 0.43).

الطاولة 2. ملخص المقررة السلوكية
خط الأساس ل 6 الشهور 6 إلى 12 الشهور
قياس النتيجة
لا. من

المرضى

تقييم

تغيير النتيجة

الوسيط (نطاق)

قيمة احتمالية
تغيير النتيجة

الوسيط (نطاق)

ص valuea
نتيجة VABS التنشئة الاجتماعية الموحدة 24 2.0 (-8, 30) .016 0 (-19, 9) .602
نتيجة VABS الاتصالات الموحدة 24 4.5 (-8, 20) .002 0.0 (-13, 13) .459
VABS التكيف السلوك نتيجة المجمع قياسي 24 3 (-3, 24) .007 0 (-12, 8) .687
نتيجة VABS موتور ستاندرد 24 0 (-10, 7) .788 0 (-14, 16) .991
نتيجة VABS الحياة اليومية ستاندرد 24 1 (-9, 34) .457 0 (-16, 16) .999
نتيجة EOWPVT الخام 22 4 (-1, 24) .001 5.5 (-12, 16) .001
PDDBI التوحد مركب T-Scoreb 25 7.52 (-12.38, -2.67) .004 0.72 (-1.14, 2.57) .430
وقيم ص هي من يلكوكسون قعت اختبار رتبة أو نموذج شريحة لPDD-BI.
ب تم جمع PDD-BI في الأساس, 3, و 6 الشهور. تغيير عشرات هي توقع متوسط (و 95% فاصل الثقة) من نموذج شريحة خطي مع عقدة في 3 الشهور.
الاختصارات: EOWPVT, معبرة واحد وورد صورة المفردات تجارب 4; VABS, فينلاند التكيف السلوك الميزان-II; PDDBI, تفشي التنموي اضطراب السلوك الجرد.
وEOWPVT هو تقييم تدار الطبيب القدرة على تطابق الكلمة المنطوقة مع صورة. وEOWPVT تحسنت النتيجة الأولية في 57% المرضى بين خط الأساس و 6 أشهر وفي 68% المرضى بين 6-12 شهرا (الطاولة 2). وارتبط تغيير في النتيجة الخام EOWPVT مع IQ غير اللفظي (خط الأساس ل 6 الشهور: RS = 0.59, 95% CI: 0.23, 0.80, ع =.002; 6-12 شهر: RS = 0.55, 95% CI: 0.15, 0.78; ع =.009), ولكن ليس العمر أو جرعة خلية غرست (ص>.05 على حد سواء).

تتبع العين النظرة هو اختبار المحوسبة حيث يتم تعقب حركات العين المشاركين من خلال جهاز كمبيوتر في حين يرى هذا الموضوع وطبيعي, التحفيز الاجتماعي الديناميكي (الممثلة بعرضين للمشاركة) وتحيط بها العديد من المحفزات الغير اجتماعية على شاشة. وقد تم قياس الانتباه نحو أربعة أهداف (عيون الممثلة ل, فم, وجه, والجزء العلوي من الجسم) وكانت النماذج GEE منفصلة يصلح لكل هدف. وشمل كل نموذج 21 المشاركين الذين تم قياس في الأساس, 6, و 12 الشهور. وأظهرت هذه النماذج ل 20% زيادة في احتمالات يحدق في عيون الممثلة على مر الزمن (OR = 1.20, 95% CI: 1.00, 1.43, ع =.048). لم تكن هناك تغييرات كبيرة في علاه في الأهداف الثلاثة الأخرى (الطاولة 3). كشفت دراسة العلاقة بين العين وتتبع وVABS-II التنشئة الاجتماعية الدرجة المعيارية أن تغيير 7 نقاط في VABS-II التنشئة الاجتماعية وارتبط الدرجة المعيارية مع 14% زيادة في احتمالات التحديق في الممثلة (OR = 1.14, 95% CI: 1.07,1.21; ص<.001).

الطاولة 3. ملخص دراسات تتبع العين (ن = 21)
النسبة المستهدفة الصعاب (95% CI)قيمة ص
عيون 1.20 (1.00, 1.43) .048
ممثلة 1.02 (0.92, 1.12) .716
فم 0.93 (0.81, 1.06) .270
وجه 1.02 (0.91, 1.14) .800
وتقدر على خلاف نسب استخدام المعمم تقدير معادلات (نموذج واحد لكل هدف) وتعكس الاتجاه متوسط ​​في الفوج بين فترات المتابعة متتالية لمدة 6 أشهر (خط الأساس ل 6 الشهور, و 6 إلى 12 الشهور).
تعديل للاختبارات متعددة
نظرا للعدد الكبير من الاختبارات السلوكية في هذه الدراسة, بحثنا امكانية نتائج إيجابية كاذبة بين تسعة مقاييس النتائج السلوكية من خلال تطبيق أسلوب روزفلت إلى الفترتين الأولى والثانية للمتابعة لمدة 6 أشهر على حدة (الطاولة 4). جميع مقاييس النتائج التي أظهرت نتائج هامة خلال أول 6 ظلت أشهر من المتابعة ذات دلالة إحصائية بعد التعديل روزفلت القيم ص. خلال الفترة من 6 إلى 12 الشهور, وEOWPVT وCGI-I بقيت ذات دلالة إحصائية بعد تطبيق الإجراء روزفلت.

الطاولة 4. قيم ص الخام وتصحيح لاختبار الخالى لم يطرأ أي تغيير على مر الزمن في النتائج السلوكية
خط الأساس ل 6 الشهور 6 إلى 12 الشهور
قياس النتائج الأولية قيمة احتمالية روزفلت قيمة احتمالية الخام قيمة احتمالية روزفلت قيمة احتمالية
نتيجة EOWPVT الخام .0001 .0009 .0011 .0059
CGI-I .0010 .0045 .0013 .0059
نتيجة VABS الاتصالات الموحدة .0020 .0060 .4590 .8262
PDDBI التوحد مركب T-Scorea .0040 .0090 .4300 .8262
VABS التكيف السلوك المركب .0070 .0126 .6870 .8833
نتيجة VABS التنشئة الاجتماعية الموحدة .0160 .0240 .6020 .8833
CGI-S .0220 .0283 .3750 .8262
النتيجة VABS الحياة اليومية ستاندرد .4600 .5175 .9999 .9999
VABS للسيارات وظيفة الدرجة المعيارية .7880 .7880 .9907 .9999
وقيم ص لPDDBI هي لخط الأساس ل 3 أشهر و 3 إلى 12 الشهور.
الاختصارات: CGI-I / S, السريرية العالمية الانطباع-تحسين / شدة; EOWPVT, معبرة واحد وورد صورة المفردات تجارب 4; فرانكلين روزفلت, كاذبة اكتشاف السعر; PDDBI, تفشي التنموي اضطراب السلوك الجرد; VABS, فينلاند التكيف السلوك الميزان-II.
نقاش
في هذه المرحلة الأولى دراسة المفتوح التسمية, قمنا بتقييم سلامة وجدوى التسريب في الوريد واحد من ذاتي دم الحبل السري عند الأطفال الصغار مع ASD. وصفنا أيضا تغييرات في مختلف مقاييس النتائج السلوكية والوظيفية لتحديد أي سيكون الأنسب للاستخدام في النهاية في تجارب العلاج بالخلايا المستقبلية. تقييم المترشحة على 12 وأشار أشهر بعد الحقن أن ضخ دم الحبل السري كان آمن وجيد التحمل. وتعتبر المتوقعة وحلها دون عقابيل جميع الأحداث ذات الصلة. وكانت كيانات لا علاقة لها الأكثر شيوعا التحريض, التغيرات الجلدية, والتهابات الطفولة النموذجية. الإثارة, خاصه, لم يكن أحد الآثار الجانبية شيوعا في الدراسات السابقة لدينا من ذاتي ضخ دم الحبل السري في الأطفال الذين يعانون من ظروف عصبية أخرى المكتسبة, وبالتالي قد تكون محددة للأطفال الذين يعانون من التوحد. في هذه الدراسة, وخضع المشاركون التخدير لMRI مباشرة قبل ضخ دماء الحبل السري. وبالتالي فإن زيادة حدوث الانفعالات قد تعكس تحديات الاستيقاظ من التخدير وجود IV ومقياس التأكسج نبض في مكان لطفل يعاني من التوحد, وعلى هذا النحو قد تكون ذات صلة حالتهم الأساسية.

تم العثور على تحسينات كبيرة في السلوك عبر مجموعة واسعة من مقاييس النتائج في هذه الدراسة. هذه التحسينات المدرجة في تدابير ذكرت الأم بما في ذلك التنشئة الاجتماعية VABS-II, الاتصالات, والسلوك التكيفي العشرات وPDDBI, تقييم الأطباء السريريين بما في ذلك CGI-S, CGI-I, وEOWPVT, وموضوعي نظرات العين تتبع القياسات. وقعت معظم التغيرات السلوكية التي لوحظت خلال أول 6 أشهر وكانت مستمرة بين 6 و 12 أشهر بعد التسريب. وتمثلت النتيجة القوي الذي IQ غير اللفظي للأطفال ارتبط مع التغيير بالنسبة لغالبية تدابير النتائج, مع ارتفاع معدل الذكاء غير اللفظي ارتباطهم تحسينات أكبر في السلوك.

من المذكرة, وكانت الغالبية العظمى من المشاركين في هذه الدراسة البيضاء, يعكس الديموغرافية فى الولايات المتحدة. من المرجح أن لديها الموارد واختيار لبنك دم الحبل السري ولادة أطفالهن في مصرف خاص. ومع ذلك, كما يحدث ASD في الأطفال من جميع الخلفيات السكانية, إذا العلاج دم الحبل السري فعال ثم الوصول ستقتصر على الأسر التي لديها الموارد للخدمات المصرفية الخاصة في حال استخدام خلايا ذاتي الوحيدة. وفقا لذلك, دراستنا القادمة ستكون بمثابة اختبار لأفضل المانحة متاح (ذاتي أو خيفي) مقابل الوهمي لتمهيد الطريق لتوسيع نطاق الحصول على هذا العلاج لجميع الأطفال المتضررين, إذا وجدت لتكون فعالة.

في حين توفر هذه النتائج بعض الأمل للعمل في المستقبل مع الحبل العلاجات المشتقة من الدم في ASD, من المهم أن نلاحظ محدودية هذه الدراسة. كما دراسة المفتوح التسمية غير المنضبط, ليس من الممكن لتحديد ما إذا كانت التغيرات السلوكية لوحظ بسبب علاج أو عكس المسار الطبيعي للتنمية خلال الفترة ما قبل المدرسة. دراسة طولية الأخيرة من الأطفال الذين تتراوح أعمارهم السويدية 1.5 إلى 3 سنوات مع ASD أظهرت تحسنا يعني من 3.0 نقاط على مقياس VABS الاتصالات و 1.0 نقطة على مقياس VABS التنشئة الاجتماعية على مدى العام 2 38, مقابل 4.5 نقاط و 2.0 نقاط, على التوالي, على مدى فترة زمنية لمدة 6 أشهر في الحبل المرضى الذين عولجوا الدم في هذه الدراسة. ومع ذلك, الاختلافات الثقافية المحتملة وكذلك توقيت مختلف المقررة تجعل من الصعب مقارنة مباشرة هاتين المجموعتين. بالإضافة إلى, صغر حجم العينة في هذه الدراسة يجعل من الصعب إجراء تقييم كامل مساهمات المتغيرات التباس. في حين أننا لم نجد علاقة بين التغيرات السلوكية والعمر, كمية من خدمات التدخل السلوكية أو جرعة الخلايا التي غرست, حجم العينة المحدود والمقيد عمر ونطاقات الجرعات قد يقلل من القدرة على الكشف عن مثل هذه الجمعيات.

كل قياس النتائج المذكورة أعلاه حساسية أظهرت أن التغيير, مشيرا إلى فائدته المحتملة في تجارب أكبر. علاوة على ذلك, كان الاستنزاف بسبب عدم الامتثال لهذه الإجراءات الحد الأدنى, مما يشير إلى أن هذه التدابير الممكنة مع الأطفال الذين يعانون من التوحد في هذه الفئة العمرية. استخدام نتائج هذه الدراسة كدليل, اخترنا نتيجة VABS التنشئة الاجتماعية الموحدة كمقياس النتيجة الأولية لدراستنا القادمة مع الإدارة من قبل الأطباء المدربين للحد من الآثار المتوقع الوالدين. توفر هذه النتيجة مقياسا التحقق من السلوكيات الاجتماعية الأساسية ذات الصلة لمرض التوحد, حساسية أظهرت أن تتغير مع مرور فترة 6 أشهر من الوقت في الدراسة الحالية, وغير مجدية في تجربة سريرية أكبر. وتمشيا مع مشروع التوجيهات الأخيرة على تصميم التجارب السريرية التوحد من الوكالة الأوروبية للأدوية 39, نحن ندرك أن العلاج واحد قد لا يحسن كل أعراض مرض التوحد وذلك التحسن الوظيفي العالمي وبالتالي عنصرا هاما في تقييم فعالية في التوحد. وبالتالي, أدرجنا أيضا CGI تصنيف الطبيب والتدابير الإضافية التي النهاية الثانوية في دراستنا القادمة, مرحلة II, تجربة سريرية عشوائية مزدوجة التعمية تهدف الى تقييم رسميا فعالية السري ضخ دم الحبل السري في تحسين الأعراض الأساسية من ASD.

____________________________

الإعلانات:

الخلايا الجذعية العلاج في أوكرانيا

____________________________

استنتاج
أثبتنا في فتح التسمية, محاكمة المرحلة الأولى أن التسريب في الوريد من ذاتي دم الحبل السري عند الأطفال الصغار مع ASD آمنة ومجدية. وصفنا تحسينات كبيرة في السلوك الملاحظ في أول 6 أشهر بعد الحقن ومستمرة في 12 الشهور. وارتبط كلما زاد معدل الذكاء غير اللفظي الأساسي مع درجة أكبر من التحسن. حددنا مقاييس النتائج التي أمكن, حساسية للتغيير, وتنمويا ملائمة لل, وبالتالي هي مناسبة للاستخدام في التجارب السريرية في المستقبل لاختبار فعالية العلاج الحبل الدم لعلاج الأطفال الصغار مع ASD.

 

 

 

 

stemcellsjournals.onlinelibrary.wiley.com

العلاج بالخلايا الجذعية